化工儀器網
詳細介紹
商品介紹：
用途： 用于血小板計數 注意事項： 由草酸銨等組成。 儲存條件：室溫，12個月 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100ml | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
血竭高鹽(標準品)英文名稱： L-Cysteine methyl ester hydrochloride高密度脂蛋白抗體包裝10MG
鴉膽子（標準品）英文名稱： Glycine methyl ester hydrochloride蛋白激底物相關蛋白抗體包裝5MG
鴉膽子苦(標準品)英文名稱： L-Glutamic acid dimethyl ester hydrochloride艾滋病病抗體包裝1g
鴉膽子D(標準品)英文名稱： L-Leucine methyl ester hydrochloride流感病H3N2血凝抗體包裝250mg
鴨腳樹葉堿（標準品）英文名稱： L-Phenylalanine methyl ester hydrochloride人瘤病16型L2抗體包裝5g
鴨跖草（標準品）英文名稱： L-Proline methyl ester hydrochlorideA型病H7N9 M1蛋白抗體包裝1g
亞硫氫鈉穿心蓮內酯（標準品）英文名稱： L-Serine methyl ester hydrochloride蛭抗體包裝25g
亞麻木酚（標準品）英文名稱： L-Tryptophan methyl ester hydrochloride副腫瘤綜合癥小腦變性相關蛋白抗體包裝5g
煙堿(標準品)英文名稱： L-Tyrosine methyl ester 植物熱休克蛋白93抗體包裝25g
延胡索（元胡）（標準品）英文名稱： L-Cysteine ethyl ester hydrochloride重組人瘤病抗體包裝5g
延胡索（標準品）英文名稱： H-Phe-OEt.HCl長鏈烯脂酰脫氫抗體包裝25g
延胡索乙；消旋延胡索乙(標準品)英文名稱： Glycine ethyl ester hydrochloride羥脫氫β抗體包裝5g
延齡草苷；地索苷（標準品）英文名稱： L-Methionine ethyl ester hydrochloride三羥基三基裂解抗體包裝1g
芫花（標準品）英文名稱： L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride 高密度脂蛋白抗體包裝250mg
芫花條（標準品）英文名稱： L-Aspartic acid β-benzyl ester磷化三羥基三基還原抗體包裝1g
硬結節(jié)桿菌Arthrobacter│scleromae 質量規(guī)格：>98%輪狀病試劑盒柯伊利-7-O-葡萄糖苷;Chryso
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規(guī)格：>98%,叔丁鹽形式輪狀病試劑盒柯諾辛B;Corynoxine B
橙黃色粘球菌Myxococcus│xanthus 質量規(guī)格：>98%,USP卵清蛋白特異性IgG試劑盒柯諾辛;Corynoxine
血小板稀釋液(計數液)青色糖單孢 3-氨基-2-萘甲酸二烯氧化物合Elisa
暗色節(jié)菱孢* 1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸酮酸激Elisa
豇豆慢生根瘤 羥鈷鹽酸鹽査爾酮合Elisa
橙色桿狀 維生B1超氧化物歧化Elisa
印度毛殼 磺異惡唑赤霉Elisa
草木樨中華根瘤 磺異惡唑赤霉3Elisa
牧草紅酵母 2-氨基-4,5,6,7-四氫苯并[b]噻吩-3-羧酸單脫氫抗壞血酸還原Elisa
枯草芽孢桿 3,4,5-三氟膽色原脫氨Elisa
光滑青霉 3-(氯磺酰)-2-噻吩羧酸甲酯淀粉Elisa
土曲霉原變種 3-氯噻吩-2-羧酸獨腳金內酯Elisa
秀珍菇 2-氨基-4-硝苯多氧化Elisa
耶爾森氏屬 2-羥基-5-多酚氧化Elisa
腸道致病性大腸埃希氏 5-羧酸尿嘧啶多聚半乳糖酸Elisa
亞羅酵母屬 氨酸丁酯二磷酸核酮糖羧化Elisa
金黃色葡萄球 氨酸丁酯二?；视虴lisa
化工儀器網