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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA Kit>>進(jìn)口ELISA Kit>>48T/96TNKB神經(jīng)激肽BELISA Kit

NKB神經(jīng)激肽BELISA Kit

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  • 型號(hào) 48T/96T
  • 品牌 其他品牌
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 所在地 上海市

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更新時(shí)間:2021-04-01 13:26:47瀏覽次數(shù):327

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

CAS 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
分子量 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 分子式 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 48T/96T
貨號(hào) GOY-E99101 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
NKB神經(jīng)激肽BELISA Kit不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

詳細(xì)介紹

ELISA Kit檢測(cè)試劑盒優(yōu)點(diǎn)多,更加方便我們的科研學(xué)者進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn),是科研實(shí)驗(yàn)的好伙伴。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

NKB神經(jīng)激肽BELISA Kit

NKB ELISA Kit

GOY-E99101

實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100µL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測(cè)溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1.加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過(guò)多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過(guò)猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。

豬核轉(zhuǎn)錄因子Y亞基γ(NFYC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬血小板激活因子ib3(PAFAHIB3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬生長(zhǎng)激素2(GH2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬原纖維蛋白3(FBN3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬髓分化因子88(MYD88)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬前列腺素E合成酶微粒體(PTGES)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬周期素依賴性激酶7(CDK7)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬纖維介素蛋白(FGL2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

豬內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(EPCR)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬補(bǔ)體C3轉(zhuǎn)化酶(C3c)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬胰高血糖素(GC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  

豬溶菌酶(LZM)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

豬鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒

NKB神經(jīng)激肽BELISA Kit穿山龍 CAS  規(guī)格: 5g 訂購(gòu)|咨詢

朝藿定B CAS 110623-73-9 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢

酸軟骨素鈉 CAS  規(guī)格: 250mg 訂購(gòu)|咨詢

榿木 CAS  規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢

甲胎蛋白(AFP) CAS  規(guī)格: 3支/套 免疫測(cè)定用 訂購(gòu)|咨詢

山綠茶 CAS  規(guī)格: 5g 訂購(gòu)|咨詢

枸櫞酸舒芬太 CAS  規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢

比妥 CAS  規(guī)格: 100mg 訂購(gòu)|咨詢

白土苓(華南肖菝葜) CAS  規(guī)格: 10g 訂購(gòu)|咨詢

卷柏(卷柏) CAS  規(guī)格: 2g 訂購(gòu)|咨詢

 CAS  規(guī)格: 1ml 訂購(gòu)|咨詢

黑豆 CAS  規(guī)格: 5g 訂購(gòu)|咨詢

銀杏內(nèi)酯C(暫行) CAS  規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢

交聯(lián)聚維 CAS  規(guī)格: 100mg 訂購(gòu)|咨詢

使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。*,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。   24μg/ml    5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 12μg/ml    4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 6μg/ml     3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 3μg/ml     2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
 1.5μg/ml   1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

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