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溶酶體藍(lán)色熒光探針

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更新時(shí)間:2022-04-21 15:06:30瀏覽次數(shù):235

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 200μL
貨號(hào) GOY-01X9806 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱(chēng) LysoBlue
溶酶體藍(lán)色熒光探針公司*的產(chǎn)品:MKK7/ERK7 絲裂原活化蛋白激MKK7抗體二四二鈉,二水 分子生物學(xué)和電泳級(jí),99%
Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) 化絲裂原活化蛋白激MKK7抗體二四二鈉,二水 用于植物培養(yǎng),≥99.0%
P53(wt-p53) 腫瘤抑制因抗體(野生型P53)L-(氧化型)98%
P53(wt-p53) 腫瘤抑制因抗體(野生型P53)

詳細(xì)介紹

商品介紹:

溶酶體藍(lán)色熒光探針LysoBlue探針是熒光素pH 指示探針,可以用來(lái)區(qū)分酸性細(xì)胞器,使得動(dòng)態(tài)研究活細(xì)胞內(nèi)溶酶體生物合成和功能成為可能。LysoView 染料是在酸性細(xì)胞器內(nèi)富集,可導(dǎo)致其質(zhì)子化。而質(zhì)子化可以減少染料的側(cè)鏈上弱堿,減少熒光淬滅,使得的熒光強(qiáng)度增加。因此,LysoBlue 試劑表現(xiàn)出pH 依賴(lài)性,在酸化條件下,熒光強(qiáng)度增加。

這些探針可以單獨(dú)或者組合使用,檢測(cè)酸化的溶酶體和細(xì)胞內(nèi)溶酶體的功能改變。例如,在某些腫瘤細(xì)胞的溶酶體具有較低的pH 值,而有的腫瘤細(xì)胞則相反。此外,一些細(xì)胞的細(xì)胞器酸化缺陷表現(xiàn)為囊性纖維化和其他病癥。LysoBlue 探針在此類(lèi)應(yīng)用上非常廣泛有意義。

濃度:1 mM in DMSO

儲(chǔ)存:-20℃,避光,有效期6個(gè)月。

產(chǎn)品屬性:

中文名稱(chēng):溶酶體藍(lán)色熒光探針

英文名稱(chēng):LysoBlue

產(chǎn)品規(guī)格:200μL

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

D-松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): DL-Lactic acidE3泛蛋白連接EDD抗體包裝25g

DL-薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ammonium citrate, tribasic胚胎外胚層發(fā)育蛋白EED抗體包裝5g

Euojaponine D英文名稱(chēng): CAS, Chrome azurol S轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體包裝25mg

Eupeasaponin I英文名稱(chēng): Cytidine-5'-triphosphate (CTP), disodium salt內(nèi)皮脂肪抗體包裝1g

Hederacolchiside A1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): CellulaseMYC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白1抗體包裝250mg

Hederacolchiside E英文名稱(chēng): Pyronin Y內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29抗體包裝100g

Hederagenin 3-O-α-L-rhamnop...英文名稱(chēng): Protamine sulfate from Salmom烯脂酰解抗體包裝5MG

Hyponine D英文名稱(chēng): BCIP, disodium salt磷化4E結(jié)合蛋白1抗體包裝1g

Hyponine E英文名稱(chēng): Copper(II) acetate, hydrate三羥酰脫氫抗體包裝250mg

Indaconitine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Creatine phosphate限制過(guò)度增殖相關(guān)蛋白EML4抗體包裝100g

Karacoline英文名稱(chēng): Fructose 1,6-bisphosphate, 3sodium saltETS1相關(guān)蛋白2抗體包裝25g

L-薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Fructose 1,6-bisphosphate,3sodium saltEFHA1蛋白抗體包裝5g

L-(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): L-Ammonium tartrate磷化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝1g

L-鼠李糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Potassium carbonate, anhydrateEFHC1蛋白抗體包裝5g

L-細(xì)辛脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): TaurineEFHC2蛋白抗體包裝25g

赭曲霉Aspergillus│ochraceus 質(zhì)量規(guī)格:BR,進(jìn)分髓過(guò)氧化物試劑盒Alpha-軟脂香樹(shù)精酯;alpha-

多食鞘桿菌Sphingobacterium│multivorum 質(zhì)量規(guī)格:>98%性鐵蛋白試劑盒日蟾它靈;Gamabufalin

美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定性神經(jīng)鞘磷脂試劑盒人參皂苷Ro;GinsenosideRo
溶酶體藍(lán)色熒光探針堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 3-基芐基溴磷酸化磷酸肌3激Elisa

根瘤 (S)-(+)-1-氨基-2-磷酸化內(nèi)皮型一氧化氮合Elisa

蘇云金芽孢桿 2,6-二氟-3-甲氧基芐KCTD9蛋白Elisa

枯草芽孢桿 1,1,1-三(4-羥苯基)乙烷穩(wěn)定1Elisa

三葉草根瘤 4-乙氧基-3-氟苯酸2-甲氧雌二Elisa

紫孢側(cè)耳(美味側(cè)耳) L-卡內(nèi)腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1Elisa

枯草芽孢桿 L-(-)-乳酸甲酯腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白2Elisa

pQE31 四甲基硫脲腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3Elisa

毛殼 十八烷酸十八烷基酯腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8Elisa

小鼠小短桿 3,5-二氟-2-甲氧基苯保護(hù)D1Elisa

巴斯德畢赤酵母 2-苯基苯并咪唑-5-磺酸抗α-烯化IgG抗體Elisa

釀酒酵母 烷基二苯磷酸酯磷酸化磷脂肌3激Elisa

大腸埃希 吡啶-2-乙磷酸化內(nèi)皮型一氧化氮合Elisa

德?tīng)柌加墟呓湍?/span> L-賴(lài)氨酸l-門(mén)冬氨酸鹽胰多肽Elisa

乳桿屬 3-甲基吡唑-5-甲酸乙酯跨膜蛋白173Elisa 

 


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