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微絲染色液(R250法)

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更新時(shí)間:2022-04-24 09:22:01瀏覽次數(shù):250

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×20ml|5×50ml
貨號(hào) GOY-01X9933 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
微絲染色液(R250法)公司正在出售的產(chǎn)品:Agrin/FITC 熒光標(biāo)記聚集蛋白抗體IgG1-哌 99%
Agtr1/AT1a/FITC 熒光標(biāo)記血管組織血管緊張Ⅱ1型受體抗體IgG無(wú)水哌 99%
AGER/Gold 金離子標(biāo)記的晚期糖化終末產(chǎn)物特異性受體抗體鈉 CP,98.0%
Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC 熒光標(biāo)記芳香烴受體抗體IgG氫化鈉 80%
A

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:微絲染色液(R250法)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:5×20ml|5×50ml

發(fā)貨周期:1~3天

商品介紹:

用途:

主要顯示由微絲構(gòu)成的應(yīng)力纖維,由于細(xì)胞對(duì)細(xì)胞基質(zhì)的附著和維持扁平鋪展的形狀,該纖維在體外培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞中尤其發(fā)達(dá)。

注意事項(xiàng):

微絲染色液在染色過程中由于微觀結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,有些纖維在光學(xué)顯微鏡下無(wú)法辨認(rèn),因此能夠看到的纖維主要是由微絲組成的應(yīng)力纖維。

儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

鷓鴣菜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Alanyl-DL-norvalineHERC4 E3泛蛋白連接抗體包裝250mg

珍珠(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3-(1-Naphthyl)-L-alanineHERC6 E3泛蛋白連接抗體包裝5g

珍珠母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-3-(2-Naphthyl)-D-alanineMMF誘導(dǎo)片段蛋白1抗體包裝1g

正丁基酞;丁基酞內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Citrulline HERPUD蛋白家族成員2抗體包裝25g

正二十九烷英文名稱: Fmoc-L-Citrulline尿黑氧化抗體包裝5g

芝麻林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-L-β-homoalanine肝生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子酪激底物抗體包裝1g

芝麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Boc-L-?-homoaspartic acid 5-benzyl esterT2識(shí)別黑色瘤抗原抗體包裝250mg

知母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-β-homoaspartic acid肝癌HHCM蛋白抗體包裝5g

知母皂苷A1英文名稱: Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester紫外切除修復(fù)蛋白R(shí)AD23A抗體包裝1g

知母皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: H-HomoArg-OH紫外切除修復(fù)蛋白R(shí)AD23B抗體包裝250mg

知母皂苷BII(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Hydroxyproline3-羥基異丁脫氫抗體包裝100g

知母皂苷E(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-HydroxyprolineHib乙酰解抗體包裝25g

梔子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Norleucine腫瘤異?;鞍?抗體包裝500g

蜘蛛香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH腫瘤異常基化蛋白2抗體包裝25mg

(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 3,5-Diiodo-L-tyrosine缺氧誘導(dǎo)因子脯酰羥化4抗體包裝1g

乳乳球菌Lactococcus lactis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)流行性腦脊髓膜炎抗體試劑盒金合歡;Acacetin

克雷伯氏菌Klebsiella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品流感病抗體IgG試劑盒;D(-)-Tartaric ac

乳乳球菌Lactococcus│lactis 質(zhì)量規(guī)格:>98%流感B病抗體IgG ;Formic acid
微絲染色液(R250法)圍小叢殼扁圓變種 1-Boc-4-甲酸壁降解Elisa

栗疫 BOC-D-脯氨色Elisa

新城疫病 2,4,6-氧基苯甲半纖維Elisa

尖鐮孢古巴專化型 2,4-二氯-5-氟查爾酮合成Elisa

玫瑰色紅球 三硫酮脂肪氧化Elisa

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 (S)-3-氨基-3-苯基油菜內(nèi)酯Elisa

Rhizobium multihospitium 2--3-吡啶總酚Elisa

黑曲霉 2-乙烯基萘生物堿Elisa

產(chǎn)氣莢膜梭 D型 5-氟-2-(三氟甲基)苯葡萄糖氧化Elisa

隆紋黑蛋巢 N-[(S)-(+)-1-(乙氧羰基)-3-苯基]-L-氨酸糞卟啉原ⅢElisa

Rhizobium alkalisoli 5-氯-3-甲熱休克蛋白70Elisa

節(jié)桿 N-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3,5-二鈉鹽(MAOS)熱休克轉(zhuǎn)錄因子Elisa

所多瑪鹽紅 N-乙基-N-(2-羥基-3-磺基)-3-甲氧基苯鈉鹽二水合物雪花蓮凝集Elisa

山梨木糖假絲酵母 BOC-L-色氨游離蛋白Elisa

陽(yáng)還原地桿 NA-酸酐有機(jī)磷Elisa

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