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細(xì)胞凋亡-Hoechst染色試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-21 16:18:07瀏覽次數(shù):277

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T
貨號(hào) GOY-01X9890 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
細(xì)胞凋亡-Hoechst染色試劑盒公司*的產(chǎn)品:TNF-beta 腫瘤壞死因子-β抗體水楊 Ph. Eur., BP, USP, 99.5-100.5%
TNFAIP1 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體水楊鈉 AR,99.5%
TNFSF14 腫瘤壞死因子配體超家族成員14抗體水楊鈉 CP,99.5%
TNFAIP3 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體水楊酰 99%
Acetylated-p5

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:細(xì)胞凋亡-Hoechst染色試劑盒

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:100T

發(fā)貨周期:1~3天

商品介紹:

用途:

快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡檢測(cè)

注意事項(xiàng):

由固定液、染色液、熒光封片劑組成,貼壁細(xì)胞,適用于懸浮細(xì)胞和組織切片。

儲(chǔ)存條件:-20℃,避光,12個(gè)月

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: EicosaneGA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子α/GABP-α抗體包裝1g

青蒿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: HeneicosaneGA結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄因子β/GABP-β1/GABP-β2抗體包裝25g

青皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Docosane 谷脫羧65+谷脫羧67抗體包裝5g

青藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tricosane谷脫羧樣蛋白1抗體包裝10mg

青陽(yáng)參苷元A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tetracosane葡萄糖-6-磷3/G6Pase-β抗體包裝1g

青陽(yáng)參苷元B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pentacosaneα葡萄糖苷/溶體α-葡糖苷抗體包裝5g

氫檳榔堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl n-Octanoate生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白3抗體包裝1g

氫東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl Nonanoate 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白4抗體包裝5g

氫高烏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl Laurate G基丁受體pi/GABAA Rπ抗體包裝1g

苘麻子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl Myristate磷化G基丁B型受體2抗體包裝5g

秋仙堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl StearateG蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白α11/Gα 11 抗體包裝1g

曲克蘆?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl LinolenateG3BP2蛋白抗體包裝5g

驅(qū)蟲斑鳩菊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methyl Linoleateγ基丁運(yùn)載蛋白2抗體包裝1g

去斑蝥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Undeceneβ1-6 N-乙?;咸烟寝D(zhuǎn)移3抗體包裝5g

去斑蝥(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Dodecene β1-6 N-乙?;咸烟寝D(zhuǎn)移7抗體包裝1g

海假交替單胞菌Pseudoalteromonas│marina 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品凝血受體試劑盒木糖;Xylitol

邊緣假單胞菌Pseudomonas│marginalis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR凝血抗凝血復(fù)合物試劑盒莽草;Shikimic acid

纖維單胞菌Cellulomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%凝血試劑盒木蝴蝶苷B;Oroxin B
細(xì)胞凋亡-Hoechst染色試劑盒天麻蜜環(huán)(京-234)* 4-溴-3,5-二促黃體生成;絨毛膜促性腺受體Elisa

假單胞屬 4-芐鹽酸鹽谷氨酰?;h(huán)化Elisa

樟疫霉 2,4-二氯-1,8-萘啶天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移同工Elisa

 噻唑-4-羧酸甲酯抗著絲粒蛋白F抗體Elisa

蟲花棒束孢 3,4-(亞甲基二氧基)苯酸脫氫1家族成員B1Elisa

Brenneria salicis  環(huán)吡酮雜質(zhì)AJanus激2Elisa

多主葡萄殼 Fmoc-2-氨基異丁酸Janus激1Elisa

阪崎腸桿 1-Boc-3-吡咯烷甲促睡眠肽αElisa

松塔牛肝 吡咯烷-3-甲酸抗sp100抗體Elisa

淺紫灰葉鏈霉 1-羥環(huán)己基苯酮色C還原核心蛋白1Elisa

新城疫病 3-(3,5-二氧基)-1,2-S亞硝基硫Elisa

鐮孢 鹽酸阿立必利干生長(zhǎng)因子-BElisa

短桿屬 噻吩磺(3-磺酰氨基-2-噻吩)微管關(guān)聯(lián)絲;蘇氨酸激2Elisa

釀酒酵母 2-氟-4-甲氧基苯甲谷氨酸脫氫Elisa

炭疽病 5-苯基吡唑-3-羧酸乙酯微管關(guān)聯(lián)絲;蘇氨酸激2Elisa


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