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酸性固綠染色液

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更新時(shí)間:2022-04-24 09:24:09瀏覽次數(shù):279

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 2×50ml
貨號(hào) GOY-01X9937 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
酸性固綠染色液公司*的產(chǎn)品:AMPK Beta1/FITC 熒光標(biāo)記腺苷單活化蛋白激β1抗體IgG無水化鋰 99.999% metals basis
Amylin/FITC 熒光標(biāo)記兔抗糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體IgG無水化鋰 99.99% metals basis
Ang- II /FITC 熒光標(biāo)記血管緊張II抗體IgG高鋰 無水, 98%
ANG-2/FITC 熒光標(biāo)記血

詳細(xì)介紹

商品介紹:

用途:

顯示細(xì)胞中堿性蛋白,尤其是組蛋白

儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:酸性固綠染色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

紫檀芪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Angiotensin III,human 癌高表達(dá)蛋白Hec1抗體包裝5g

紫檀香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Apamin 磷化荷爾蒙敏感脂肪抗體包裝1g

紫菀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clomiphene citrate組蛋白去乙?;?抗體包裝1g

紫菀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SR3335;ML176半乳糖基轉(zhuǎn)移2抗體包裝5g

紫云英苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SU5416 磷化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅)包裝1g

自然銅(醋煅)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Milbemycin oxime異染色質(zhì)蛋白1磷化抗體(果蠅)包裝5g

棕櫚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Valdecoxib缺氧誘導(dǎo)因子2α /HIF-2α抗體包裝100g

棕矢車菊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gastrin I,human 型流感病M2抗體包裝25g

走馬胎(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Uridine 5'-diphosphoglucuronic acid trisodium salt熱休克蛋白-47抗體包裝5g

祖師麻(唐古特瑞香)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ticarcillin disodium salt人類狀瘤病16抗體包裝25mg

鉆山風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ticarcillin disodium salt缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體HIF-1α包裝25g

醉椒英文名稱: Arg-Gly-Asp 組蛋白H3抗體包裝5g

醉魚草皂苷IVb(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Heparin lithium人類皰疹病8抗體/皰疹病8型包裝100g

多巴(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Secretin Acetate人類巨病抗體包裝25g

左旋樟腦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Thymol人類皰疹病8抗體包裝5g

醬油曲霉Aspergillus│sojae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng)磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白試劑盒基當(dāng)藥寧;Methylswertian

巨大芽孢桿菌Bacillus│megaterium de Bary 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%標(biāo)準(zhǔn)品磷脂轉(zhuǎn)移蛋白β試劑盒7-O-基白楊;7-O-Methyl

: 43476資源名稱: 偶發(fā)分枝桿菌偶發(fā)亞種 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR磷脂酰乙試劑盒巨大戟; Ingenol
酸性固綠染色液多主葡萄殼 (2S,3aS,7aS)-八氫-2-羧酸抗氧化Elisa

根瘤 5-溴-2-甲氧基苯甲法尼基焦磷酸合Elisa

松生擬層孔 2,3,6,7,10,11-六甲氧基三亞苯角鯊烯單加氧;鯊烯環(huán)氧Elisa

Stenotrophomonas rhizophila AE-活性酯β-香樹脂合成Elisa

玫瑰考克氏 Nω-(4-甲氧基-2,3,6-三磺?;?-L氨酸鯊烯合Elisa

菜豆根瘤 BOC-L-3,4-二氯苯氨酸抗性淀粉Elisa

巨孢鏈霉 (S)-(+)-6,6'-二溴-1,1'-聯(lián)-2-萘酚植酸Elisa

短柄帚霉 木質(zhì)磺酸鈣原花青Elisa

玉米大斑病 4-氟-2-生長(zhǎng)Elisa

糞腸球 甲氧基聚乙二麥芽糖Elisa

屎腸球 甲氧基聚乙二ATP合成Elisa

檸條根瘤 甲氧基聚乙二漆Elisa

畢赤酵母 甲氧基聚乙二類黃酮Elisa

Escherichia 3,5-二甲基異噁唑-4-磺酰(基)氯乙烯合成Elisa

浸麻類芽孢桿 4-氨苯基酸鹽酸鹽乙烯氧化Elisa 

 


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