化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
2×1ml | 1～3天 |
商品介紹：
用途： 檢測細(xì)胞自噬 儲存條件：-20℃，避光，12個月 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
人參皂苷Rh1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol磷化糖皮質(zhì)激受體抗體包裝25g
人參皂苷Rh3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： (S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體包裝5g
人參皂苷Rh7(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam糖皮質(zhì)激受體β抗體包裝100g
人參皂苷Rh8(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： p-Anisic Acid胰島葡萄糖6磷2抗體包裝25g
人參皂苷Rk1（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 9-Anthracenecarboxylic Acid葡萄糖氧化抗體包裝5g
人參皂苷Rk2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin葡萄糖苷2β/Glucosidase IIβ抗體包裝5MG
人參皂苷RK3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 2-Naphthoyl Chloride谷脫氫2抗體包裝10MG
人參皂苷Ro（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 4-Dimethylaminocinnamaldehyde磷化谷受體1抗體包裝1g
人工虎骨（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2,3-Naphthalenedicarboxylic Anhydrideγ-谷酰解抗體包裝250mg
人工牛黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2,4,6-3(pentadecafluoroheptyl)-1,3,5-triazine谷酰-脯酰-tRNA合成抗體包裝100g
忍冬藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2,4,6-3(pentafluoroethyl)-1,3,5-triazine谷氧還蛋白2抗體包裝25g
絨毛龍芽草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2,4,6-3(heptafluoropropyl)-1,3,5-triazine谷氧還蛋白5抗體包裝5g
鞣花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： α-Thioglycerol 過氧化2抗體包裝100g
肉蓯蓉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic Acid 過氧化7抗體包裝25g
肉蓯蓉（管花肉蓯蓉）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 4'-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic AcidS轉(zhuǎn)移α1抗體包裝5g
: CGMCC1.458資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,可用于培養(yǎng)尿激試劑盒雷酚內(nèi)酯;Triptophenolide
稻麥角菌Claviceps│oryzae-sativae 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%尿苷二磷葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移試劑盒藍(lán)萼;Glaucocalyxin A
節(jié)桿菌Arthrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品尿苷二磷葡萄糖轉(zhuǎn)移2試劑盒蘆竹堿;Gramine
MDC染色液米根霉 4-溴丁酰氯周期依賴性激1Elisa
白地霉 3-羥基-5-甲酸鹽酸多巴Elisa
黃發(fā)鏈霉 乙基溴化鎂膜聯(lián)蛋白A6Elisa
細(xì)枝孢 O-叔丁基-L-叔丁酯人分泌型卷曲相關(guān)蛋白5Elisa
耐輻射奇球 5-羧基熒光琥珀酰亞酯凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白8Elisa
交替紅色桿屬 3-溴-2-(溴甲基)酸乙酯乙?；哌w移族蛋白Elisa
柱孢屬 3,3-二甲基烯酸甲酯尾肢同源蛋白2Elisa
小棱盤 丁二酸胃生長Elisa
多主葡萄殼 Boc-statineCD69分子Elisa
溶淀粉類芽孢桿 2-庚基苯并咪唑血管加壓Elisa
油菜核病 七甲基二硅氮烷簇集蛋白Elisa
乳白耙 3-甲?；?4-羥基組織因子途徑抑制物1Elisa
大腸埃希 甲酸-d2細(xì)小病B29-IgG抗體Elisa
東方伊薩酵母 異丁基鋰細(xì)小病B29-IgM抗體Elisa
貝酵母 4,4'-二異酸基-3,3'-二甲基聯(lián)苯轉(zhuǎn)錄中介因子1βElisa
化工儀器網(wǎng)