細(xì)胞自噬染色檢測試劑盒(MDC法)公司*的產(chǎn)品：Trk B 酪氨激B抗體2,2,2-三氟 分子生物學(xué)級，99.8%
Trk C 酪氨激C抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)2,2,2-三氟 NMR grade, ≥99.8%
Trop-2 原肌球蛋白抗體(3,3,3-三氟)二硅烷 98%
TRP2 酪氨相關(guān)蛋白2抗體二苯烷 99%
Thioredoxin 硫氧還蛋白抗體碳化鎢 粉末，99

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：細(xì)胞自噬染色檢測試劑盒(MDC法)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：100T

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

肉蓯蓉苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 4'-Hydroxyazobenzene-4-carboxylic Acid HydrateS轉(zhuǎn)移κ抗體包裝50g

肉豆蔻（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Carboxymethoxylamine Hemihydrochloride半乳糖激1抗體包裝1g

肉豆蔻木脂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Girard's Reagent P糖原蛋白2抗體包裝5g

肉豆蔻,十四烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione磷半乳糖尿苷轉(zhuǎn)移1抗體包裝1ml

肉桂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： N-tert-Butyl-α-phenylnitrone糖原蛋白1抗體包裝5g

肉桂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 16-DOXYL-stearic Acid Free Radical葡萄糖合成2抗體包裝250mg

肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： CLA谷草轉(zhuǎn)2抗體包裝10g

肉桂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： MCLA葡萄糖-6磷脫氫抗體包裝250g

肉桂葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： FCLA Free Acid葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5抗體包裝50g

乳香（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Red-CLA葡萄糖合成1抗體包裝1g

瑞香/祖師麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： IsoluminolG蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝250mg

塞骨（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl] Oxalate甘油激3抗體包裝25g

噻二（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Disodium 8-Amino-1,3,6-naphthalene 3sulfonate Hydrate高爾基體磷蛋白3樣蛋白抗體包裝1g

噻二苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Coumarin 102磷化谷受體1抗體包裝5g

賽門苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Coumarin 314G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝1g

葡萄穗霉Stachybotrys│chartarum 質(zhì)量規(guī)格：>98%尿苷二磷葡萄糖轉(zhuǎn)移1試劑盒蘿卜硫苷;Glucoraphanin

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：>98%鳥苷結(jié)合蛋白4試劑盒藜蘆基;3,4-Dimethoxybe

肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：含量測定鳥苷交換因子試劑盒藜蘆;Veratraldehyde
細(xì)胞自噬染色檢測試劑盒(MDC法)黑曲霉 檸檬酸鋰 四水合物磷酸化外紡錘體樣蛋白1Elisa

香菇 2,5-二氟-4-羥基苯甲鳥苷酸交換因子Elisa

明尼蘇達(dá)被毛孢 6-羧基四甲基羅丹明 for fluorescence,嘌呤能受體P2Y11Elisa

武夷小單孢 1-Boc-3-基血管緊張Ⅰ受體抗體Elisa

北京芽孢桿 1-BOC--4-甲酰載脂蛋白L2Elisa

米曲霉 6-氯-2-甲基吡啶-3-酸蛋白酪氨酸磷酸OElisa

類諾卡氏 3-溴-2-羧酸乙酯核糖核蛋白BElisa

蠅鵝膏 基乙鳥苷酸Elisa

泡囊短波單胞 3-(N-Boc-氨基)氮雜丁烷類泛蛋白Elisa

大腸埃希氏 D-二異酯非磷酸化酮酸脫氫Elisa

Pseudarthrobacter 2-丁氧基苯酸前膠原賴氨酸-1,2-酮戊二酸-5-雙加氧1Elisa

弗雷德里克斯堡假單胞 2-氯乙基乙血小板糖蛋白VElisa

大腸桿 5-氯戊血小板衍化生長因子DDElisa

康氏木霉 Fmoc-L-精氨酸激活受體樣激1Elisa

蒼白鹽八疊球 6-氯煙酰四旋蛋白2Elisa