中性紅染色液(活細(xì)胞專(zhuān)用)公司*的產(chǎn)品：VDCC-L Beta L-型電壓依賴(lài)型鈣通道β抗體D-核糖 用于植物培養(yǎng)，≥99%（HPLC)
VEGF 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體烯, CP,>98%(GC)
VEGF 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體液體石蠟 CP
VEGF-A 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A抗體液體石蠟 輕質(zhì)、密度：0.84-0.86
PROK1/PRK1/EG-VEGF 內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長(zhǎng)

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：中性紅染色液(活細(xì)胞專(zhuān)用)

英文名稱(chēng)：

產(chǎn)品規(guī)格：100ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

牛角粉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Laminarin from Laminaria digitataγ-谷酰轉(zhuǎn)肽5輕鏈抗體包裝5g

翁花（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Pancreatinγ-谷酰轉(zhuǎn)肽7輕鏈抗體包裝50mg

仙苷(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Papain溶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體包裝1g

楊苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Papain糖原合激3α+β抗體包裝5g

楊梅根（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： PancreatinG2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體包裝25g

楊酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Pancreatin生長(zhǎng)分化因子8/肌肉抑制抗體包裝5g

蛭(螞蟥)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Orphenadrine citrate磷化糖原合激3α/β抗體包裝25g

絲瓜甙B英文名稱(chēng)： β-GalactosidaseSEC63域內(nèi)含蛋白1抗體包裝5g

絲石竹皂苷元-3-O-β-D-葡萄糖酯英文名稱(chēng)： Abscisic acid,S-ABAA型病H7N9 M1蛋白抗體包裝1g

斯皮諾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Abscisic acid,S-ABA人類(lèi)狀瘤病33 E6蛋白抗體包裝5g

四氫小檗堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Abscisic acid,S-ABABeta基己糖苷beta亞基蛋白A鏈抗體包裝10MG

四氫鴨腳木堿英文名稱(chēng)： PEPSIN磷化熱休克蛋白-70抗體包裝100g

松柏；4-羥基-3-氧基肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Ribonuclease A from bovine pancreas磷化熱休克蛋白-70抗體包裝25g

松果菊苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Andarine19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框38抗體包裝5g

松苓新英文名稱(chēng)： PEPSIN乙酰肝抗體包裝10mg

光滑假絲酵母Candida│glabrata 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9試劑盒雷公藤內(nèi)酯;Triptolide,14

陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品膜內(nèi)?；脑噭┖新仿吠?Liquidambaric a

雷夫松氏菌Leifsonia│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95%,蛋白≤0.1%膜聯(lián)蛋白A2試劑盒利卡靈-B;(-)-Licarin B
中性紅染色液(活細(xì)胞專(zhuān)用)硬結(jié)節(jié)桿 4-甲基鄰苯二白關(guān)聯(lián)球蛋白樣受體1Elisa

鞘氨 4-氟-2-甲白關(guān)聯(lián)球蛋白樣受體2Elisa

*灰葡萄孢 甘油縮甲γ谷氨酰轉(zhuǎn)移Elisa

糞腸球 3-溴-5-甲酸甲酯（易）酪氨酸激受體BElisa

毛霉屬 環(huán)戊基苯酸β位淀粉樣前體蛋白裂解2Elisa

弓形蟲(chóng)(GJS-3株) 鹽酸特拉唑磷酸化蛋白激C亞性D型Elisa

北京擲孢酵母 2-甲氧基-6-甲基吡啶突觸核蛋白βElisa

蓋替隱球酵母 1,4-二溴-2,3-丁二酮氨酸豐富重復(fù)G蛋白偶聯(lián)受體5Elisa

淺灰小雙孢 1-(4-吡啶基)酮激錨定蛋白4Elisa

廣西腐霉 3-氨基-2-氯吡啶緊密連接蛋白4Elisa

黑曲霉 4-環(huán)己酮羧酸甲酯可溶性Klotho蛋白Elisa

空腸彎曲桿 5-氯-1H-吡咯并[2,3-B]吡啶不飽和脂肪酸Elisa

近緣毛殼 3-乙酰氨基鄰苯二甲酸酐飽和脂肪酸Elisa

鞘氨桿 1,7-二氯-4-氧雜庚烷人可溶性EndoglinElisa

釀酒酵母 5-氯香草酸蛋白激D2Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)