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活細胞核染料(紅)

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更新時間:2022-04-21 14:52:22瀏覽次數(shù):316

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500μL
貨號 GOY-01X9785 應用領域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
活細胞核染料(紅)公司正在出售的產(chǎn)品:Nrn1/Cpg15/Neuritin 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體四丁硫氫銨 98%
Neurocan 神經(jīng)粘蛋白抗體四丁硫氫銨 離子對色譜
NGB 腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白抗體四丁溴化 98%
NeuroD1 神經(jīng)元分化因子1抗體三鹽鹽 for HPLC, ≥99.0%
Neurofascin/Nfasc155 神經(jīng)束蛋白-155三鹽鹽 99%
NT 神

詳細介紹

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

活細胞核染料(紅)


500μL

1~3天

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:

新型活細胞核酸染料( Ex/Em:647/660 nm, bound to DNA)是一種具有細胞膜透性的核酸染料,其在于核酸結(jié)合之后熒光強度會得到顯著增強。Nuclear View Red 活細胞核酸染料可以用于染死的或者活的真核細胞的RNA 和DNA,在革蘭氏細菌中同樣也適用。新型活細胞核酸染料具有如下重要特性:

細胞膜透性,可以穿過幾乎所有的細胞膜,包括哺乳動物細胞和細菌。

極低的熒光背景,未與核酸結(jié)合時,染料的量子產(chǎn)率通常<0.01。

與核酸結(jié)合之后,量子產(chǎn)率通常> 0.4。

活細胞核酸染料可以在不同的實驗應用中染活細胞或者固定細胞的核酸,能夠與配備了常規(guī)激光激發(fā)器或?qū)拵д彰鞴庠吹母鞣N熒光檢測設備匹配。

佳的染色探針濃度取決于不同的應用程序類型,此處建議的初始條件是基于驗證的特定細胞類型,具體實驗中應摸索加以調(diào)整。

儲存:-20℃,有效期六個月。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。

建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。

普魯雜質(zhì)A(標準品)英文名稱: Pantoprazole Sodium無胸腺癥相關蛋白DGCR6/迪格奧爾格綜合征關鍵基因6抗體包裝5g

鹽羅格列雜質(zhì)(標準品)英文名稱: Fasudil hydrochloride朊蛋白DPL抗體包裝100mg

鹽羅哌(標準品)英文名稱: Fasudil hydrochloride肌強直性營養(yǎng)不良蛋白激抗體包裝1g

鹽羅哌(標準品)英文名稱: Rhodionin有絲分裂控制蛋白dis3抗體包裝1g

鹽羅哌右旋體(鹽羅哌雜質(zhì)B)(標準品)英文名稱: Rhodiosin肝癌新基因3蛋白抗體包裝5g

鹽羅通定(標準品)英文名稱: Dideoxyinosine;DidanosineDapper2蛋白抗體包裝25g

鹽洛美沙星(標準品)英文名稱: Icariin I;  Icariside IDapper3蛋白抗體包裝5g

鹽馬尼地平(標準品)英文名稱: Baohuoside II背神經(jīng)管核蛋白抗體包裝1g

鹽馬普替林(標準品)英文名稱: Sophoricoside雙基精解1抗體包裝25g

鹽嗎啉胍(標準品)英文名稱: Sophoricoside絲/蘇蛋白激DCAMKL1抗體包裝5g

鹽美金剛(標準品)英文名稱: Methylophiopogonanone A 唐氏綜合征粘附分子抗體包裝25g

鹽美利曲辛(標準品)英文名稱: Methylophiopogonanone B磷脂磷HTPAP抗體包裝5g

鹽美司坦(標準品)英文名稱: 7,2-Dihydroxy-3,4-Dimethoxyisoflavan穿膜蛋白DLK1抗體(C端)包裝25g

鹽美西律(標準品)英文名稱: 3-Hydroxy-9,10-Dimethoxypterocarpan二氫葉還原樣1抗體包裝5g

鹽咪達普利(標準品)英文名稱: Oroxyloside脫氧尿苷三磷DUT抗體包裝1g

: 3alvar.2B.3339資源名稱: 乙型副傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品同型半胱試劑盒松脂二葡萄糖苷;Pinoresinol

繩索狀芽孢桿菌Bacillus│funiculus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR鐵-過氧化物岐化試劑盒棗仁皂苷B;Jujuboside B

黏著海桿菌Marinobacter│adhaerens 質(zhì)量規(guī)格:>99%以上,S-構(gòu)型無結(jié)晶鐵調(diào)25試劑盒棗仁皂苷A;Jujuboside A
活細胞核染料(紅)葉生布勒擔子酵母 雜氮雙環(huán)磷酸酯葡糖氨基聚糖Elisa

谷氨酸棒桿 3-乙酰基-6-氯咪唑并[1,2-B]噠多配體聚糖-1Elisa

大腸埃希氏 抗氧劑 LK-1081Ras三磷酸鳥苷激活樣蛋白Elisa

柔嫩艾美耳球蟲 2-氯-4-肼血管抑Elisa

Methylobacterium variabile 3-乙氧基苯酸吡啶并林Elisa

金耳 2,3-二甲氧基磷脂酰肌抗體Elisa

DB (彌漫大B瘤) (通過STR鑒定) 8-氨基-6-甲氧基喹啉抗磷脂酰絲氨酸凝血原復合物IgG抗體Elisa

炭疽芽胞桿 聚乙烯肉桂酸酯抗磷脂酰絲氨酸凝血原復合物IgM抗體Elisa

*蛹蟲草 肉堿富馬酸鹽凝血IgG抗體Elisa

離中不粘柄 3-氯-5-氟芐凝血IgM抗體Elisa

海洋沉積物芽孢桿 3,5-二氟苯布魯氏桿IgG抗體Elisa

彎曲假單胞 N-甲基-3-氟芐布魯氏桿IgM抗體Elisa

果生鏈核盤 (3S,4S)-1-芐基吡咯烷-3,4-二布魯氏桿IgA抗體Elisa

芽胞桿 2-羥基-2-甲基-N-[4-基--3-(三氟甲基)苯基]-3-[4-(氟苯基)硫]酰B瘤因子3Elisa

生黑鏈霉 1,2-環(huán)氧-2-甲基-N-[4-基--3-(三氟甲基)苯基]-烯酰肝配蛋白A1Elisa

 


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