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線粒體紅色熒光染色試劑盒-M01

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更新時(shí)間:2022-04-21 15:51:53瀏覽次數(shù):300

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1000T|2000T
貨號(hào) GOY-01X9859 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
線粒體紅色熒光染色試劑盒-M01公司正在出售的產(chǎn)品:Phospho-SHIP2 (Tyr986/987) 化蛋白酪氨2抗體直接黑38 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Phospho-SHIP2 (Tyr580) 化蛋白酪氨2抗體分散橙 分析標(biāo)準(zhǔn)品
SIAH1 泛連接Siah1抗體分散黃 3 分析標(biāo)準(zhǔn)品
SIAH2 泛連接Siah2分散藍(lán)3 分析標(biāo)準(zhǔn)品
SIP1 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體分散藍(lán)7 分析

詳細(xì)介紹

商品介紹:

M11線粒體染色試劑盒是利用M 系列探針進(jìn)行線粒體特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的M11線粒體染色探針為紅色熒光標(biāo)記的線粒體探針,具有579/599nm的大激發(fā)/發(fā)射波長。本品適合雙標(biāo)實(shí)驗(yàn),因其紅色熒光與其他的綠色熒光探針具有良好的分辨率。

M系列探針是一種細(xì)胞滲透型的對(duì)活細(xì)胞中的線粒體體進(jìn)行選擇性染色的一類新型熒光染料,該系列探針可以選擇性標(biāo)記線粒體,包含標(biāo)記線粒體的弱巰基反應(yīng)性的氯甲基官能團(tuán)。只需簡單孵育細(xì)胞,即可穿過細(xì)胞膜并直接聚集在活性線粒體上??捎行?biāo)記活細(xì)胞。一旦線粒體被染色后,還能根據(jù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的需求進(jìn)行固定(醛類固定劑如)和透化(醛類去污劑如Triton X-100),探針依然維持在細(xì)胞內(nèi)。

雖然傳統(tǒng)的線粒體熒光探針如TMR和羅丹明123,也能很容易的聚集在功能線粒體上,但是一旦線粒體膜電位喪失即會(huì)被洗掉,從而在一些需要細(xì)胞進(jìn)行醛類固定或者包含線粒體能量狀態(tài)影響因子的實(shí)驗(yàn)中,使其應(yīng)用大受限制,而M 系列探針不受線粒體膜電位影響。

M系列線粒體探針具有多種顏色可以選擇,可根據(jù)情況對(duì)樣品進(jìn)行多色標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。除了本試劑盒的紅色熒光探針,我公司還可以提供綠色、藍(lán)色、橙色等顏色的染色試劑盒。

儲(chǔ)存條件:染料-20℃避光保存;避免反復(fù)凍融;稀釋液2-8℃保存。

有效期:六個(gè)月。

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

線粒體紅色熒光染色試劑盒-M01


1000T|2000T

1~3天


操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè):

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

江南卷柏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fmoc chlorideβ腎上腺能受體激2抗體包裝25g

江藤苷英文名稱: Florisil®腺苷環(huán)化Gα蛋白/Gαs/olf抗體包裝5g

姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Magnesium silicate adsorbent(Synthetic)周期蛋白G相關(guān)激抗體包裝1g

姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fluazifop-P-butyl solution糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體包裝5g

姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱:  Famoxadone solution環(huán)指蛋白27抗體包裝1g

降二氫辣椒堿英文名稱: Flufenoxuron透明質(zhì)結(jié)合蛋白1抗體包裝250mg

降香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: FomesafenG蛋白偶聯(lián)受體激6抗體包裝5g

膠蒼術(shù)甙,羧基蒼術(shù)苷二鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: FlutolanilRho GTP激活蛋白26抗體包裝1g

焦地黃乙甙A1英文名稱: FlusilazoleG蛋白α抑制蛋白1抗體包裝25g

焦地黃乙甙B1英文名稱: Fipronil生長停滯特異性蛋白6抗體包裝5g

焦性沒食子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fenobucarb合成抗體包裝100ml

絞股藍(lán)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fenpyroximate血型糖蛋白δ抗體包裝500ml

絞股藍(lán)皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fenoxaprop-p-ethyl糖皮質(zhì)激誘導(dǎo)亮拉鏈蛋白抗體包裝25g

絞股藍(lán)皂苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amberlite® IRC-748γ-谷酰轉(zhuǎn)肽6抗體包裝5g

絞股藍(lán)皂苷XLIX(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amberlyst 15 ion-exchange resinG基丁受體δ/GABAA Rδ抗體包裝1g

鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR去乙?;疭irtuin-1試劑盒尿嘧啶;Uracil

芬克纖維微菌Cellulosimicrobium│funkei 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品去乙酰化饑餓激試劑盒鳥嘌呤;Guanine

鏈霉菌菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR去唾液糖蛋白受體試劑盒L-鳥鹽鹽;L(+)-Ornith
線粒體紅色熒光染色試劑盒-M01Stenotrophomonas rhizophila (可定) 3-氟吡啶-4-酸頻哪酯胰凝乳蛋白Elisa

溜曲霉 10-樟腦磺酰氯腫廇蛋白P63Elisa

黑曲霉 1,7-二溴庚烷色P450 11A;BElisa

燕麥?zhǔn)人嵛鞴蟻喎N* 1,4-二氫-1,4-甲橋萘色P450 17Elisa

金黃硬皮馬勃 亞硫酸酯色P450 19Elisa

金黃色葡萄球金黃亞種 O'-(Carboxymethyl)fluoresceinamide色P450 21Elisa

乳酸乳球乳亞種 3-氟-2-甲氧基苯17β羥基類固脫氫Elisa

金黃色葡萄球金黃亞種 二(1-苯基-異喹啉)(乙酰酮)合銥(III)假尿苷酸合5Elisa

盤狀肉座 三[1-苯基異喹啉-C2,N]銥(III)假尿苷酸合6Elisa

大腸埃希氏 3,5-二-O-(對(duì)甲苯酰)-2-脫氧-Α-D-呋喃核糖氯轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員6Elisa

黃曲霉 (S)-(+)-薄荷腦二苯基膦90kDa熱休克蛋白β1Elisa

長白山近藤氏酵母 4-(1-)吡啶HBsAg-preS1Elisa

噴泉鏈霉 Valnoctamide組織蛋白VElisa

pGAPZαA 氚代溴苯氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP線粒體F1復(fù)合體β肽Elisa

無花果曲霉 2-(噻吩-2-基)乙基對(duì)甲苯磺酸酯CD24分子Elisa

 


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