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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞組織染色>>PluronicF-127

PluronicF-127

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更新時(shí)間:2022-04-21 14:53:45瀏覽次數(shù):379

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1g
貨號(hào) GOY-01X9789 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
PluronicF-127公司*的產(chǎn)品:NIS 鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體6-氨-1-己 97%
NIT2 NIT2蛋白抗體烯硅烷 98%
Substance P Receptor P物質(zhì)受體抗體丁炔二 98%
NK-2R 神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體4-溴-2-氟苯 99%
NKA 神經(jīng)激肽A抗體硅烷 98%
NKB 神經(jīng)激肽B抗體2,6-二氟苯 97%
NKG2A NK受體2A抗

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:PluronicF-127

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:1g

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹:

Pluronic F-127是一種非離子型表面活性劑,它具有100%的活性并且對細(xì)胞相對無毒性的,常與染料AM酯一起使用,以增強(qiáng)其水溶性。它在低溫下可溶,但是在室溫下成凝膠狀。

使用Pluronic? F-127 作為探針加載助溶劑由于某些AM 酯在水溶液中不溶解,低毒性的Pluronic? F-127 常常被用于促進(jìn)細(xì)胞加載染料。這種非離子型的去污劑在在DMSO 中的終濃度可以達(dá)到20%(w/v)。有時(shí)在制備儲(chǔ)液時(shí),也會(huì)用到Pluronic? F-127,40 度溫和加熱可以協(xié)助Pluronic? F-127 溶于DMSO,但Pluronic? F-127 可以降低AM 酯的穩(wěn)定性,所以,建議好僅在工作液中使用Pluronic? F-127。

備注:Pluronic? F-127 制備成20%的DMSO 儲(chǔ)液后,避光保存,有效期6 個(gè)月。

儲(chǔ)存:RT,有效期12個(gè)月。

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鹽替羅非班(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(?)-Salicin轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體包裝1g

鹽替扎尼定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-(?)-Salicin磷化轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體包裝5g

鹽頭孢吡肟 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Magnolol真核肽鏈釋放因子1抗體包裝10MG

鹽頭孢噻呋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Magnolol真核肽鏈釋放因子3a抗體包裝1g

鹽頭孢他美酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Esomeprazole magnesium trihydrate表皮生長因子受體底物15抗體包裝5g

鹽土霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rutin內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN1抗體包裝10MG

鹽托烷司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rutin內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN2抗體包裝100g

鹽妥拉唑林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Neosperidin dihydrochalcone內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位蛋白ERGI3抗體包裝25g

鹽妥洛特羅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Neosperidin dihydrochalcone內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化物蛋白Ero1-Lα抗體包裝5g

鹽萬古霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxymatrine內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp19抗體包裝25g

鹽維拉帕米(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Oxymatrine內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp72抗體包裝5g

鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Andrographolide結(jié)核分枝桿菌分泌性蛋白ESAT6抗體包裝100g

鹽戊乙奎(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Andrographolide真核翻譯起始因子1抗體包裝25g

鹽西替利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Apigenin上皮粘連調(diào)控蛋白ESRP2抗體包裝500g

鹽溴己新(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ApigeninT和嗜性粒表達(dá)特應(yīng)性皮炎蛋白ETEA抗體包裝1g

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:含量測定糖原磷化同工II試劑盒;Strychnine

菲羅茄畢赤氏酵母Pichia│philogaea 質(zhì)量規(guī)格:>855ug/MG,USP30糖原磷化同工BB試劑盒山姜;Alpinetin

平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測定糖原磷化試劑盒D-松;D-Pinitol
PluronicF-127假單胞 5-甲基水楊酸抗單鏈DNA抗體;變性DNA抗體Elisa

小孢矛束霉 4-嗎啉乙酸鹽酸鹽磷脂酰肌抗體IgGElisa

米曲霉 1-甲基吡唑-3-磺酰氯磷脂酰肌抗體IgMElisa

霍氏腸桿 1,4-二-2-(易)瘤病16型E6蛋白抗體Elisa

堀越氏芽孢桿 乙酸薄荷酯瘤病16型E7蛋白抗體Elisa

白色念珠 4-氨基-N-甲酰共濟(jì)失調(diào)蛋白Elisa

Marisediminicola 氨酸芐酯擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因Elisa

山茶 扎托布洛芬5核苷酸Elisa

黑曲霉 外-3,6-環(huán)氧-1,2,3,6-四氫鄰苯二甲酸酐核受體輔阻遏物2Elisa

岸海桿狀 2-羥基苯基酸αL巖藻糖苷Elisa

葡萄座腔屬 2-溴苯酸乙酯弗里德賴希共濟(jì)失調(diào)蛋白Elisa

糙孢籃狀 [1,3-二(2,4,6-苯基)-2-亞咪唑烷基]二氯-(3-苯基-1H-茚-1-亞基)(三環(huán)己抗BP180-IgE抗體Elisa

綠色木霉=木木霉 5-氯-2,3-二氟吡啶抗BP230-IgE抗體Elisa

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 4,6-二甲氧基-2-(苯氧基羰基)氨基嘧啶甘露糖Elisa

扣囊復(fù)膜孢酵母 (S)-3-氨基-3-(4-)酸甲酯血小板膜糖蛋白ⅡbElisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

 


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