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抗酒石酸酸性磷酸酶染液

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更新時(shí)間:2022-04-21 14:54:16瀏覽次數(shù):460

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T
貨號(hào) GOY-01X9790 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
抗酒石酸酸性磷酸酶染液公司*的產(chǎn)品:NKG2D/CD314 NK受體2D抗體N--1-萘鹽鹽 97%
NKR(Neuromedin B Receptor) 神經(jīng)激肽B受體抗體炔 98%
NKR/Neurokin B receptor 神經(jīng)激肽B受體抗體三苯銻 97%
Nm23 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制因抗體2-(硅) 98%
Nm23-H1 腫瘤抑制因抗體海藻 CP
Nm23-H2 腫瘤抑制

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

中文名稱(chēng):抗酒石酸酸性磷酸酶染液

英文名稱(chēng):

產(chǎn)品規(guī)格:20T

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹:

檢驗(yàn)原理:

在酸性的緩沖液中,細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸酶催化底物水解,其生成物進(jìn)而與一種穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián),生成不溶性的偶氮染料沉淀,當(dāng)?shù)孜镏写嬖诰剖釙r(shí),該反應(yīng)只出現(xiàn)在特異性細(xì)胞中。

用途:

抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色可以了解破骨細(xì)胞的功能狀態(tài),并對(duì)毛細(xì)胞性白血病有助診斷,本染液可用于石蠟切片、血液、骨髓及培養(yǎng)細(xì)胞的涂片、爬片、以及冰凍切片的細(xì)胞染色。

儲(chǔ)存:4℃,有效期6個(gè)月。

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鹽伊托必利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Oleanolic acid電子轉(zhuǎn)移黃蛋白脫氫抗體包裝25g

鹽依匹斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Oleanolic acidEGF受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝5g

鹽乙?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Oleanolic acid乙激2抗體包裝25g

鹽乙哌立松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Shikimic acid磷化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體包裝5g

鹽異(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Shikimic acid磷化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體包裝100g

鹽異腎上腺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Riociguat嗜性粒過(guò)氧化物抗體包裝10g

鹽左西替利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pheniramine Maleate核內(nèi)切G抗體包裝25g

鹽左旋咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): FTase Substrate, Fluorogenic酪蛋白激受體A10抗體包裝500g

鹽左氧沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Linaclotide 胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體包裝100ml

氧沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): benzoylpaeoniflorin 磷化4E結(jié)合蛋白1抗體包裝25ml

(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝1g

葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Alisol A 24-acetate泛交聯(lián)抗體包裝250mg

伊潘立(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Alisol C monoacetate EB病核抗原-3B抗體包裝100g

伊曲康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sclareolide磷化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體包裝25g

伊索拉定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sclareolide乙?;D(zhuǎn)移EID1抗體包裝5g

: IFFI06005資源名稱(chēng): 嗜乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格:potency>980ug/mg,BR糖原合成激3試劑盒桑皮苷A;mulberroside A

土地戈登氏菌Gordonia│terrae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品糖原合成激試劑盒麝香;3-Methylcyclopen

果生鏈核盤(pán)菌Monilinia│fructigena Honey 質(zhì)量規(guī)格:94.0-105.0%,USP,BR糖原合成天然;Borneol
抗酒石酸酸性磷酸酶染液球形芽孢桿 葉綠銅鈉鹽戊型肝炎病抗原Elisa

地中海擬無(wú)枝酸 沙美特羅類(lèi)白抗原B27Elisa

熱帶假絲酵母 苯基-β-D-吡喃半乳糖苷補(bǔ)體因子PElisa

出芽短梗霉 5-氨基異酞酸單甲酯絲氨酸肽抑制因子Kazal型4Elisa

空腸彎曲桿 芐基苯基碳酸酯色P4503A4Elisa

佛雷德里克斯堡假單胞 2-氨基-6-溴乙型腦炎病IgG抗體Elisa

Aurantimonas coralicida 2,6,7-三氯-3-三氟甲基喹喔啉維甲酸誘導(dǎo)基因1蛋白Elisa

疏水戈登氏 N-異基-4甲酸類(lèi)固硫酸酯Elisa

熒光假單胞 9-雙環(huán)[3.3.1]壬烷磺基轉(zhuǎn)移Elisa

濟(jì)州單胞 鄰芐基苯3β羥基5類(lèi)固脫氫Elisa

黑根霉 9-溴-1-壬烯膽固7α羥化Elisa

谷氨酸棒桿 2-溴-6-羥基吡啶類(lèi)固17α單加氧Elisa

蠟狀芽孢桿 4-(2,2,2-三氟乙氧基)類(lèi)固異構(gòu)Elisa

油菜核病 4-氨基-2-氯-3-硝基吡啶皮質(zhì)類(lèi)固11β脫氫同工1Elisa

施氏假單胞 L-乳酸鋰皮質(zhì)類(lèi)固11β脫氫同工2Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

 


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