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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
中文名稱(chēng)：抗酒石酸酸性磷酸酶染液
英文名稱(chēng)：
產(chǎn)品規(guī)格：20T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
檢驗(yàn)原理： 在酸性的緩沖液中，細(xì)胞內(nèi)酸性磷酸酶催化底物水解，其生成物進(jìn)而與一種穩(wěn)定的重氮鹽偶聯(lián)，生成不溶性的偶氮染料沉淀，當(dāng)?shù)孜镏写嬖诰剖釙r(shí)，該反應(yīng)只出現(xiàn)在特異性細(xì)胞中。 用途： 抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）染色可以了解破骨細(xì)胞的功能狀態(tài)，并對(duì)毛細(xì)胞性白血病有助診斷，本染液可用于石蠟切片、血液、骨髓及培養(yǎng)細(xì)胞的涂片、爬片、以及冰凍切片的細(xì)胞染色。 儲(chǔ)存：4℃，有效期6個(gè)月。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
鹽伊托必利（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Oleanolic acid電子轉(zhuǎn)移黃蛋白脫氫抗體包裝25g
鹽依匹斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Oleanolic acidEGF受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝5g
鹽乙?。?biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Oleanolic acid乙激2抗體包裝25g
鹽乙哌立松（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Shikimic acid磷化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體包裝5g
鹽異（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Shikimic acid磷化上皮癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體包裝100g
鹽異腎上腺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Riociguat嗜性粒過(guò)氧化物抗體包裝10g
鹽左西替利（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Pheniramine Maleate核內(nèi)切G抗體包裝25g
鹽左旋咪唑（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： FTase Substrate, Fluorogenic酪蛋白激受體A10抗體包裝500g
鹽左氧沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Linaclotide 胞吐囊復(fù)合體蛋白2抗體包裝100ml
氧沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： benzoylpaeoniflorin 磷化4E結(jié)合蛋白1抗體包裝25ml
氧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid磷化絲裂原活化蛋白激1/2抗體包裝1g
葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Alisol A 24-acetate泛交聯(lián)抗體包裝250mg
伊潘立(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Alisol C monoacetate EB病核抗原-3B抗體包裝100g
伊曲康唑（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Sclareolide磷化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體包裝25g
伊索拉定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Sclareolide乙?；D(zhuǎn)移EID1抗體包裝5g
: IFFI06005資源名稱(chēng): 嗜乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格：potency>980ug/mg,BR糖原合成激3試劑盒桑皮苷A;mulberroside A
土地戈登氏菌Gordonia│terrae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品糖原合成激試劑盒麝香;3-Methylcyclopen
果生鏈核盤(pán)菌Monilinia│fructigena Honey 質(zhì)量規(guī)格：94.0-105.0%,USP,BR糖原合成天然;Borneol
抗酒石酸酸性磷酸酶染液球形芽孢桿 葉綠銅鈉鹽戊型肝炎病抗原Elisa
地中海擬無(wú)枝酸 沙美特羅類(lèi)白抗原B27Elisa
熱帶假絲酵母 苯基-β-D-吡喃半乳糖苷補(bǔ)體因子PElisa
出芽短梗霉 5-氨基異酞酸單甲酯絲氨酸肽抑制因子Kazal型4Elisa
空腸彎曲桿 芐基苯基碳酸酯色P4503A4Elisa
佛雷德里克斯堡假單胞 2-氨基-6-溴乙型腦炎病IgG抗體Elisa
Aurantimonas coralicida 2,6,7-三氯-3-三氟甲基喹喔啉維甲酸誘導(dǎo)基因1蛋白Elisa
疏水戈登氏 N-異基-4甲酸類(lèi)固硫酸酯Elisa
熒光假單胞 9-雙環(huán)[3.3.1]壬烷磺基轉(zhuǎn)移Elisa
濟(jì)州單胞 鄰芐基苯3β羥基5類(lèi)固脫氫Elisa
黑根霉 9-溴-1-壬烯膽固7α羥化Elisa
谷氨酸棒桿 2-溴-6-羥基吡啶類(lèi)固17α單加氧Elisa
蠟狀芽孢桿 4-(2,2,2-三氟乙氧基)類(lèi)固異構(gòu)Elisa
油菜核病 4-氨基-2-氯-3-硝基吡啶皮質(zhì)類(lèi)固11β脫氫同工1Elisa
施氏假單胞 L-乳酸鋰皮質(zhì)類(lèi)固11β脫氫同工2Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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