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詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒：
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng)，能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí)，提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類(lèi)產(chǎn)品的3-5倍，能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase，該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增，提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱(chēng)：賈第蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱(chēng)：Giardia spp.
貨號(hào)：GOY-M4048
規(guī)格：50T
產(chǎn)品特性： 高特異性：本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶，90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性，可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度：本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板，且重復(fù)性好。 高適用性：本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR：包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí)，只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦骸⒁?、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye：一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上，用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同，用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O：超純水，用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng)：
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料，實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮，請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑，并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ，也可以將樣品研磨后放在 Trigol中，動(dòng)植物組織 ： 50～100mg/mlTrigol，貼壁細(xì)胞：10cm2/mlTrigol，懸浮細(xì)胞：5×106動(dòng)植物，酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理：
熒光定量PCR早稱(chēng)TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
羥基紅花黃色素APhytophthora megasperma Drechsler胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
豬去氧膽酸Acanthamoeba lenticulata Molet and Ermolief ..胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
金絲桃素Homo sapiens, human ascites胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
金絲桃苷f(shuō)rozen胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
羊藿苷Glycomyces rutgersensis Labeda et al.胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
羊藿次苷I（95%）Aspergillus arenarius Raper et Fennell, ana ..胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
毛冬青酸Lysobacter sp.胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
歐前胡素Botryosphaeria ribis Grossenbacher et Dugga ..胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
賈第蟲(chóng)通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒西貝母堿Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
靛藍(lán)Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..蛋白C(PROC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
靛玉紅Leishmania infantum Nicolle蛋白C(PROC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
肌苷Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..Ⅳ型膠原α1(COL4α1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
伊立替康Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..外皮蛋白(EVPL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)小鼠堿性磷酸酶 落葉松樹(shù)脂醇二醚
S-BUTYRYLTHIOCHOLINE IODIDERabbit HSP-27/HSPB1 (Heat Shock Protein 27) ELISA Kit
小鼠血管生成素4 Lansiumarin C
NESSLER'S REAGENTRabbit PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit
大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白 四酸堪非醇酯
LITHIUM IODIDERabbit 15-LO (Arachidonate 15-Lipoxygenase) ELISA Kit
人淋巴細(xì)胞趨化因子 Kadsurin A
ACETYLTHIOCHOLINE IODIDERabbit MYL1 (Myosin Light Chain 1, Alkali, Fast Skeletal) ELISA Kit
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ Juglanin
Lead(II) iodideRabbit CX26 (Connexin 26) ELISA Kit
大鼠鈣調(diào)磷酸酶 Isothymusin
THALLIUM(I) IODIDERabbit AQP-3 (Aquaporin 3) ELISA Kit
相對(duì)定量簡(jiǎn)介：
分析方法： ①雙標(biāo)曲法 ②2 － △Ct ③2 － △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式：
優(yōu)點(diǎn)：分析簡(jiǎn)單，實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單產(chǎn)品僅用于科研
缺點(diǎn)：對(duì)每一個(gè)基因，每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線；必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線；這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用：基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一。
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