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禽白血病病毒亞群PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-02-28 13:38:33瀏覽次數(shù):102

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應用領域 化工 主要用途 僅供科研實驗
英文名稱 Avian Leukosis Virus(ALV)ARTPCR 規(guī)格 50T
禽白血病病毒亞群PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:利什曼原蟲通用PCR檢測試劑盒
熱帶利什曼原蟲PCR檢測試劑盒
同豬生殖與呼吸綜合癥病毒歐洲株PCR檢測試劑盒
通用PCR檢測試劑盒

詳細介紹

實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2
Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性定量方法,已得到,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

4.png

操作流程
收集基因信息——>設計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結(jié)果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

禽白血病病毒亞群PCR檢測試劑盒

Avian Leukosis Virus(ALV)ARTPCR

50T

下列相關產(chǎn)品:
對蝦桃拉病毒(TSV)核酸檢測試劑盒

多里病毒PCR檢測試劑盒

多瘤病毒PCR檢測試劑盒

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PCR實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93
預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在727min。
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4
待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

定量PCR方法:
a、競爭法  產(chǎn)品僅用于科研實驗
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b
、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c
、PCRELISA
利用di高辛等標記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結(jié)合,再加入抗di高辛酶標抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。

操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4
2.
設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL
3.
樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.
除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37
水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.
棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.
每孔加入底物A、B50μL,37
避光孵育15min
7.
每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
2-Amino-4-methylbenzothiazole  1477-42-5  中文名:2-氨基-4-并噻唑  分子式:C8H8N2S  度:98.0%      小鼠環(huán)0酸鳥苷   英文名稱:   cyclic adenosine monophosphate   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   cGMP

2-Amino-4'-fluorobenzophenone  3800/6/4  中文名:  分子式:C13H10FNO  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子   英文名稱:   ciliary neuroophic factor   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   CF

2-Amino-4-chlorobenzothiazole  19952-47-7  中文名:2-氨基-4-氯苯并噻唑  分子式:C7H5ClN2S  度:98.0%  關鍵詞:    白細胞分化抗原14   英文名稱:   cluster of differeiation aigen 14   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   CD14

2-Amino-3-methylbenzoic acid  4389-45-1  中文名:2-氨基-3-甲酸  分子式:C8H9NO2  度:98.0%      可溶性細胞表面分化抗原40配體   英文名稱:   Soluble Cluster of differeiation aigen 40 ligand   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   sCD40L

2-Amino-3-hydroxyanthraquinone  117-77-1  中文名:2-氨基-3-羥基蒽醌  分子式:C14H9NO3  度:98.0%      小鼠Aelisa試劑盒   小鼠A試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠A試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠A試劑盒、小鼠Aeisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

1021868-77-8  PPNDS  10mg  Cortex lycii地骨皮染料法PCR鑒定試劑盒 

1021868-77-8  PPNDS  50mg  Cortex lycii地骨皮染料法PCR鑒定試劑盒 

1021868-83-6  ARL 67156 trisodium salt  10mg  Fructus kochiae地膚子染料法PCR鑒定試劑盒 

1021868-90-5  AGN 192403 hydrochloride  10mg  Fructus kochiae地膚子染料法PCR鑒定試劑盒 

1021868-90-5  AGN 192403 hydrochloride  50mg  Medulla junci燈心草染料法PCR鑒定試劑盒
禽白血病病毒亞群PCR檢測試劑盒100016-62-4  Calcitonin (chicken)  5mg  Retinervus luffae fructus絲瓜絡探針法PCR鑒定試劑盒 

100020-57-3  2-Methylthioadenosine triphosphate tetrasodium salt  10mg  Retinervus luffae fructus絲瓜絡探針法PCR鑒定試劑盒 

1000277-08-6  MGB-BP-3  1mg  Radix rehmanniae preparata熟地黃探針法PCR鑒定試劑盒 

1000277-08-6  MGB-BP-3  5mg  Radix rehmanniae preparata熟地黃探針法PCR鑒定試劑盒 

1000277-08-6  MGB-BP-3  10mg  Caulis polygoni multiflori首烏藤探針法PCR鑒定試劑盒

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