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螺旋體通用PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-03 15:23:40瀏覽次數(shù):160

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
應用領域 化工 主要用途 僅供科研實驗
英文名稱 Borrelia spp.PCR 規(guī)格 50T
螺旋體通用PCR檢測試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品:傳染性非典型肺炎病毒PCR檢測試劑盒
傳染性膿皰病毒PCR檢測試劑盒
傳染性胃腸炎病毒PCR檢測試劑盒
傳染性胸膜肺炎PCR檢測試劑盒

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌PCR檢測試劑盒

詳細介紹

實時熒光定量PCR
實時熒光定量PCR技術有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標準曲線獲得定量結果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標是建立在兩個基礎之上的:
1
Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2
Ct值與起始模板的線性關系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關系,可利用標準曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標準曲線定量的方法。
外標準曲線的定量方法相比內(nèi)標法是一種準確的、值得信賴的科學方法。利用外標準曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準確,重現(xiàn)性定量方法,已得到,廣泛用于基因表達研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領域。

5.png



操作流程
收集基因信息——>設計引物——>PCR ——>回收目的片段——>與載體連接,取得連接產(chǎn)物 ——> 用感受態(tài)細胞做轉(zhuǎn)化 ——>接菌——>陽性克隆(酶切法或PCR)——>質(zhì)粒抽提——>質(zhì)粒測序——>測序結果分析——>克隆信息輸入數(shù)據(jù)庫——>質(zhì)粒實物保存。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

螺旋體通用PCR檢測試劑盒

Borrelia spp.PCR

50T

下列相關產(chǎn)品:
克雷伯菌通用PCR檢測試劑盒

克里米亞剛果出血熱病毒PCR檢測試劑盒

克羅諾桿菌通用PCR檢測試劑盒

克柔念珠菌PCR檢測試劑盒

PCR實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl    
引物110pM
2 μl    
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl      
ddH2O 50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93
預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在727min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4
待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

定量PCR方法:
a、競爭法  產(chǎn)品僅用于科研實驗
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b
、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應管中加入已定量的內(nèi)標和引物,內(nèi)標用基因工程方法合成。上游引物用熒光標記,下游引物不標記。在模板擴增的同時,內(nèi)標也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標為對照定量待檢測模板。
c
、PCRELISA
利用di高辛等標記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針所結合,再加入抗di高辛酶標抗體-辣根過氧化物酶結合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCRELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標,作出標準曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。

操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4。
2.
設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.
樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.
除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37
水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.
棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.
每孔加入底物AB50μL37
避光孵育15min。
7.
每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

下列是公司正在銷售的產(chǎn)品:
5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine  25961-11-9  中文名:  分子式:C16H14ClNO  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

5-[Bis(2-hydroxyethyl)amino]-1-methyl-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  3543-74-6  中文名:  分子式:C18H27N3O4  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠抗利尿激素elisa試劑盒   小鼠抗利尿激素試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠抗利尿激素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗利尿激素試劑盒、小鼠抗利尿激素eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  29927-08-0  中文名:5,6--2-苯并噻唑胺  分子式:C9H10N2S  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體elisa試劑盒   小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒、小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  147086-79-1  中文名:  分子式:C8H8OS2  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAelisa試劑盒   小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒、小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAeisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one   115473-15-9  中文名:  分子式:C7H10ClNOS  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠抗紅細胞抗體elisa試劑盒   小鼠抗紅細胞抗體試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠抗紅細胞抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗紅細胞抗體試劑盒、小鼠抗紅細胞抗體eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

101827-46-7  Butenafine HCl  10mM(in1mLDMSO)  Radix rhapontici漏蘆染料法PCR鑒定試劑盒 

101827-46-7  Butenafine HCl  1g  Arillus longan龍眼肉染料法PCR鑒定試劑盒 

101827-46-7  Butenafine HCl  5g  Arillus longan龍眼肉染料法PCR鑒定試劑盒 

101831-37-2  Diclazuril  10mM(in1mLDMSO)  Radix gentianae龍膽染料法PCR鑒定試劑盒 

101831-37-2  Diclazuril  50mg  Radix gentianae龍膽染料法PCR鑒定試劑盒
螺旋體通用PCR檢測試劑盒25460-87-1  Ac-Glu-NH2  1g  Cortex dictamni白鮮皮LAMP鑒定試劑盒 

49706-31-2  Z-His-NHNH2  100g  Radix cynanchi atrati白薇LAMP鑒定試劑盒 

35010-96-9  Z-Pro-Gly-NH2  25g  Radix cynanchi atrati白薇LAMP鑒定試劑盒 

7369-94-0  (H-Cys-Tyr-OH)2  1g  Radix pulsatillae白頭翁LAMP鑒定試劑盒 

19522-40-8  H-D-Glu-NH2  5g  Radix pulsatillae白頭翁LAMP鑒定試劑盒

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