簡要描述：沙門診斷血清采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，針對沙門氏菌血清型特異性基因設(shè)計(jì)引物和探針。PCR擴(kuò)增過程中，與模板結(jié)合的探針被Taq酶分解產(chǎn)生熒光信號，熒光定量PCR儀根據(jù)檢測到的熒光信號繪制出實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線。

 沙門氏菌抗血清在兔體內(nèi)培育，包括O和H抗血清。Vi抗體為單克隆抗體，在小鼠腹腔液中生成并提取。根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康?，抗血清可單?dú)或聯(lián)合使用?？寡骞?yīng)規(guī)格為3 ml瓶裝產(chǎn)品（以疊氮hua鈉作為防腐劑）。已通過吸附排除交叉反應(yīng)。

 當(dāng)細(xì)菌培養(yǎng)物與直接針對細(xì)菌表面成分的特異性抗血清混合時(shí)，細(xì)胞之間將通過抗原-抗體鍵結(jié)合在一起而形成聚集（凝集）。通常裸眼可以觀察到在懸液中的團(tuán)塊形成。通過將特異性抗血清與沙門氏菌培養(yǎng)物混合，可以確定O和H抗原。根據(jù)觀察到的凝集結(jié)果并結(jié)合Kauffmann-White表1可確定細(xì)菌的血清型。

丹麥SSI沙門氏菌屬診斷血清試劑盒說明書

步驟通用
將生理鹽水作為陰性對照，并且其檢測結(jié)果必須為陰性。如陰性對照結(jié)果為陽性（凝集），則表明菌株發(fā)凝集，即O粗糙型。

與O和H抗血清的玻片凝集
使沙門氏菌在非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上生長過夜。半固體瓊脂培養(yǎng)基是zui適用于H分型的培養(yǎng)物生長的培養(yǎng)基，但如H抗原表達(dá)良好，則可以在非選擇性瓊脂培養(yǎng)基上確定血清型。
1. 將一小滴（約20 μl）抗血清滴在玻片上。
2. 將來自培養(yǎng)基的一些菌落取樣轉(zhuǎn)移到抗血清液滴中，然后充分混合。培養(yǎng)物的數(shù)量應(yīng)足以產(chǎn)生明顯的乳白色混濁。取樣使用接種環(huán)或牙簽。
3. 將玻片前后傾斜5 – 10秒。
4. 手持玻片在采用暗背景的光源前（間接照明）用裸眼進(jìn)行觀察，讀出反應(yīng)結(jié)果。

5. 陽性反應(yīng)為可見凝集。陰性反應(yīng)為保持均一的乳白色混濁。遲發(fā)或較弱的凝集應(yīng)視為陰性結(jié)果。 無反應(yīng)的原因可能是菌株表達(dá)Vi抗原（見下文）、所用抗血清未能包含待檢菌株的血清型或菌株并非沙門 氏菌。

Vi 抗原的檢測
Vi抗原的存在可能干擾或阻止菌株與O抗血清的凝集反應(yīng)。因此對陰性分離株必須檢測Vi抗原。因在Vi抗 原中可能形成變異，所以選擇單一菌落是非常重要的，表達(dá)Vi抗原的菌落較Vi陰性菌落的不透光性更強(qiáng)。

在瓊脂平板上的H相誘導(dǎo)（S. Gard方法）2
1. 使半固體瓊脂在微波爐或水浴中融化（100 °C），然后冷卻至45°C。
2. 將100 μl用于相誘導(dǎo)（對應(yīng)于已經(jīng)確定的相）的H抗血清置于一個(gè)小培養(yǎng)皿的中央。
3. 將10 ml半固體瓊脂倒入抗血清中，最終結(jié)果是形成相誘導(dǎo)血清的1:100稀釋液。
4. 將平板于室溫（22-25°C）下放置10-15分鐘，待其凝固。
5. 用接種環(huán)從瓊脂平板或肉湯培養(yǎng)基中取出一滿環(huán)新鮮細(xì)菌培養(yǎng)物，接種在平板的中央。
6. 于35-37°C培養(yǎng)一整夜。
7. 在生長區(qū)域邊緣取培養(yǎng)物用于玻片凝集。使用Kauffmann-White表選用相關(guān)的H抗血清。 如H相誘導(dǎo)未成功，則需考慮增加在半固體瓊脂平板中的抗血清數(shù)量。

 廣州健侖生物科技有限公司主營：梅里埃API手工操作系列、ATB半自動系列、VITEK鑒定藥敏卡系列、VIDAS免疫系列，Carestart熱帶傳染病系列試劑、G6PD檢測試劑，美國inbios乙腦、黑熱病RK39等傳染病試劑，愛諾華INOVA自身免疫診斷試劑，美國安度斯鱟試劑，澳大利亞Cellabs瘧疾ELISA試劑、熱帶病試劑，丹麥SSI診斷血清，日本生研免疫診斷血清，泰國SA沙門氏菌診斷血清，德國Nadal萊姆病、CRP，德國SIFIN抗ABO血型、原料，德國凱杰Qiagen提取試劑，韓國RapiGEN中東呼吸綜合征檢測，美國FOCUS免疫熒光玻片，美國FULLER免疫熒光玻片，美國高滋cortez傳染病檢測系列，歐洲Fast-track呼吸道多聯(lián)檢測，西班牙Certest傳染病檢測系列，西班牙Vircell核酸質(zhì)控，英國OXOID血清系列，韓國SD熱帶傳染病試劑，BinaxNOW瘧疾檢測、G6PD檢測，雅培Abott傳染病檢測試劑，美國seracare血清盤，zeptometrix診斷血清。

想了解更多信息，歡迎咨詢我們獲取資料。