質(zhì)量控制:用于食品、藥品、環(huán)境等領(lǐng)域中與糞腸球菌相關(guān)檢測(cè)的質(zhì)量控制??蓪?duì)檢測(cè)方法、培養(yǎng)基、試劑等進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估和驗(yàn)證,如驗(yàn)證培養(yǎng)基對(duì)糞腸球菌的生長(zhǎng)支持能力、選擇性和特異性等。
方法驗(yàn)證:在相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證中,作為標(biāo)準(zhǔn)菌株確認(rèn)檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和可靠性,包括增菌、分離、鑒定等環(huán)節(jié)能否有效檢出糞腸球菌。
實(shí)驗(yàn)室能力評(píng)估:幫助實(shí)驗(yàn)室評(píng)估自身的檢測(cè)能力和操作水平,定期使用該菌株進(jìn)行實(shí)驗(yàn),可及時(shí)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過程中存在的問題,以保證微生物檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量。
形態(tài)特征:革蘭氏陽(yáng)性球菌,菌形圓或橢圓,可順鏈的方向延長(zhǎng),直徑 0.5 - 1.0 微米,大多數(shù)成雙或短鏈狀排列,通常不運(yùn)動(dòng),無莢膜,無芽孢。
培養(yǎng)特性:兼性厭氧,對(duì)環(huán)境適應(yīng)力和抵抗力強(qiáng),生長(zhǎng)條件要求不嚴(yán)格。能在 10℃或 45℃、pH9.6 或含 6.5% NaCl 肉湯培養(yǎng)基中生長(zhǎng),并能耐 65℃30 分鐘。在麥康凱瓊脂平板上形成較小、干燥、粉紅色菌落。觸酶試驗(yàn)陰性,分解甘露chun,不分解阿拉伯糖,膽汁七葉苷試驗(yàn)陽(yáng)性,多數(shù)菌株 PYR 試驗(yàn)陽(yáng)性,對(duì)桿菌tai耐藥。
通常采用西林瓶包裝,內(nèi)裝凍干粉。常見規(guī)格可能為 1 支 / 盒等,具體會(huì)因產(chǎn)品批次和銷售形式有所不同。
西林瓶應(yīng)置于 - 20℃保存,避免反復(fù)凍融,以保持菌株的活性。若為短期保存,也可在 2 - 8℃下存放5。
復(fù)蘇:復(fù)蘇前應(yīng)準(zhǔn)備適于該菌種生長(zhǎng)的培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備,所有操作均應(yīng)在符合生物安全保護(hù)及無菌條件下進(jìn)行。啟開前,用 75% 酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,打開西林瓶膠塞,加入復(fù)蘇液,將凍干菌種制成懸浮液,然后用無菌滴管或移液器吸取適量,移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板或液體培養(yǎng)基上,按推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)和傳代保存。
培養(yǎng)和傳代:糞腸球菌質(zhì)控菌種購(gòu)買后應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用,復(fù)蘇后的菌種一般宜傳代 2 - 3 次后使用,菌種傳代 5 次后建議棄置。培養(yǎng)時(shí)需按照推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行,一般為 37℃左右,培養(yǎng)時(shí)間根據(jù)具體培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?,如在一些選擇性培養(yǎng)基上可能需培養(yǎng) 48 小時(shí)左右。