質(zhì)量控制:用于食品、藥品、環(huán)境等領(lǐng)域中與 EHEC 相關(guān)檢測(cè)的質(zhì)量控制,如對(duì)檢測(cè)方法、培養(yǎng)基、試劑等進(jìn)行質(zhì)量評(píng)估和驗(yàn)證??沈?yàn)證培養(yǎng)基對(duì) EHEC 的生長(zhǎng)支持能力、選擇性和特異性,確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
方法驗(yàn)證:在相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證中,作為標(biāo)準(zhǔn)菌株確認(rèn)檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性和可靠性,包括增菌、分離、鑒定等環(huán)節(jié)能否有效檢出 EHEC。例如在新的食品微生物檢測(cè)方法建立時(shí),使用該菌株確定方法的檢出限、精密度等指標(biāo)。
實(shí)驗(yàn)室能力評(píng)估:幫助實(shí)驗(yàn)室評(píng)估自身的檢測(cè)能力和操作水平。定期使用該菌株進(jìn)行實(shí)驗(yàn),可及時(shí)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過程中存在的問題,如操作是否規(guī)范、設(shè)備是否正常運(yùn)行等,以保證微生物檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量,滿足相關(guān)法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的要求。
形態(tài)特征:革蘭氏陰性桿菌,大小約為 (0.4 - 0.7)μm×(1 - 3)μm,無芽孢,多數(shù)菌株有周身鞭毛,能運(yùn)動(dòng),有菌毛1。
培養(yǎng)特性:兼性厭氧,在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。最適生長(zhǎng)溫度為 33 - 42℃,37℃繁殖迅速,44 - 45℃生長(zhǎng)不良,45.5℃停止生長(zhǎng)1。
生化特性:除不發(fā)酵或遲緩發(fā)酵山梨chun外,其他常見的生化特征與大腸埃希氏菌基本相似,但也有某些生化反應(yīng)不完quan一致,具有鑒別意義。例如,EHEC O157:H7 雖然有 uidA 基因,但其編碼的 β - 葡萄糖醛酸酶無活性,不能分解 4 - 甲基傘形酮 - β - D - 葡萄糖醛酸苷(MUG)產(chǎn)生熒光,即 MUG 陰性1。
通常采用西林瓶包裝,內(nèi)裝凍干粉。常見規(guī)格可能為 1 支 / 盒等,具體會(huì)因產(chǎn)品批次和銷售形式有所不同。
應(yīng)置于 - 20℃保存,避免反復(fù)凍融,以保持菌株的活性。若為短期保存,也可在 2 - 8℃下存放3。
復(fù)蘇:?jiǎn)㈤_前,用 75% 酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,打開西林瓶膠塞,加入復(fù)蘇液,將凍干菌種制成懸浮液,然后用無菌滴管或移液器吸取適量,移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板或液體培養(yǎng)基上,按推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)和傳代保存。推薦的復(fù)蘇培養(yǎng)基為腦心浸液培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件為 36℃±1℃,培養(yǎng) 24 - 48 小時(shí)。
培養(yǎng)和傳代:購(gòu)買后應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用,復(fù)蘇后的菌種一般宜傳代 2 - 3 次后使用,菌種傳代 5 次后建議棄置。培養(yǎng)時(shí)需按照推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行,保存溫度為 2 - 8℃,轉(zhuǎn)接頻率為一個(gè)月。