形態(tài)特征:革蘭氏陽性短桿菌,大小約為 0.5μm×1.0 - 2.0μm,直或稍彎,兩端鈍圓,常呈 V 字型排列,偶有球狀、雙球狀。無芽孢,一般不形成莢膜,有 4 根周毛和 1 根端毛,但周毛易脫落。
生長特性:生長范圍為 2 - 42℃,最適培養(yǎng)溫度為 35 - 37℃。在 pH 中性至弱堿性(pH9.6)、氧分壓略低、二氧化碳張力略高的條件下生長良好。在血瓊脂上生長良好,四周有狹窄的溶血帶。
生化特性:觸酶陽性,氧化酶陰性,能發(fā)酵多種糖類,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,如發(fā)酵葡萄糖、乳糖、水楊素、麥芽糖、鼠李糖、七葉苷、蔗糖(遲發(fā)酵)、山梨chun、海藻糖、果糖,不發(fā)酵木糖、甘露chun、肌醇、阿拉伯糖、側(cè)金盞花醇、棉子糖、衛(wèi)矛醇和纖維二糖,不利用枸櫞酸鹽,40% 膽汁不溶解,吲哚、硫化氫、尿素、明膠液化、硝酸鹽還原、賴氨酸、鳥氨suan均陰性,VP、甲基紅試驗(yàn)和精氨suan水解陽性。
質(zhì)量控制:用于食品、藥品、環(huán)境等領(lǐng)域中與李斯特氏菌相關(guān)檢測的質(zhì)量控制,如對檢測方法、培養(yǎng)基、試劑等進(jìn)行質(zhì)量評估和驗(yàn)證。例如,驗(yàn)證培養(yǎng)基對英諾克李斯特氏菌的生長支持能力、選擇性和特異性等,確保檢測過程的準(zhǔn)確性和可靠性。
方法驗(yàn)證:在相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法的驗(yàn)證中,作為標(biāo)準(zhǔn)菌株確認(rèn)檢測方法的準(zhǔn)確性和可靠性,包括增菌、分離、鑒定等環(huán)節(jié)能否有效檢出英諾克李斯特氏菌,以及與單核細(xì)胞增生李斯特氏菌等其他相關(guān)菌種的區(qū)分能力。
實(shí)驗(yàn)室能力評估:幫助實(shí)驗(yàn)室評估自身的檢測能力和操作水平。定期使用該菌株進(jìn)行實(shí)驗(yàn),可及時(shí)發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)過程中存在的問題,如操作是否規(guī)范、儀器設(shè)備是否正常運(yùn)行、檢測人員的技能是否熟練等,以保證微生物檢測結(jié)果的質(zhì)量,確保實(shí)驗(yàn)室具備準(zhǔn)確檢測李斯特氏菌的能力。
通常采用西林瓶包裝,內(nèi)裝凍干粉。常見規(guī)格可能為 1 支 / 盒等,具體會(huì)因產(chǎn)品批次和銷售形式有所不同。
應(yīng)置于 - 20℃保存,避免反復(fù)凍融,以保持菌株的活性2。若為短期保存,也可在 2 - 8℃下存放23。
復(fù)蘇:啟開前,用 75% 酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,打開西林瓶膠塞,加入復(fù)蘇液,將凍干菌種制成懸浮液,然后用無菌滴管或移液器吸取適量,移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板或液體培養(yǎng)基上,按推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。推薦的復(fù)蘇培養(yǎng)基可為腦心浸液瓊脂(BHIA)培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件為 37℃,培養(yǎng) 18 - 24 小時(shí)23。
培養(yǎng)和傳代:購買后應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用,復(fù)蘇后的菌種一般宜傳代 2 - 3 次后使用,菌種傳代 5 次后建議棄置3。培養(yǎng)時(shí)需按照推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行,保存溫度為 2 - 8℃,轉(zhuǎn)接頻率為一個(gè)月