形態(tài)特征:革蘭氏陰性菌,呈長棒形,大小約為長 1.5 - 3.0μm、寬 0.5 - 0.8μm。單個、成對或偶爾成短鏈,菌體有 1 - 3 根鞭毛,運動活潑,無芽胞,能形成莢膜。
培養(yǎng)特性:專性需氧菌,培養(yǎng)適宜溫度為 35℃,pH 值為 7.2。在普通瓊脂培養(yǎng)基上形成光滑、微隆起、邊緣整齊波狀的中等大菌落,因產(chǎn)生水溶性的綠膿素(呈藍(lán)綠色)和熒光素(呈黃綠色),使培養(yǎng)基變?yōu)辄S綠色,菌落表面呈現(xiàn)金屬光澤。在血液瓊脂培養(yǎng)基上,菌落周圍出現(xiàn)溶血環(huán)。
生化特性:分解蛋白質(zhì)能力強(qiáng),發(fā)酵糖類能力較低。能分解葡萄糖、伯膠糖、單奶糖、甘露糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,不分解麥芽糖、菊糖、棉籽糖、甘露chun、乳糖及蔗糖。能液化明膠,分解尿素,不形成吲哚,氧化酶試驗陽性,可利用枸櫞酸鹽,不產(chǎn)生 H?S,MR 試驗和 VP 試驗均為陰性。
質(zhì)量控制:用于食品、藥品、化妝品、環(huán)境等領(lǐng)域中與銅綠假單胞菌相關(guān)檢測的質(zhì)量控制??蓪z測方法、培養(yǎng)基、試劑等進(jìn)行質(zhì)量評估和驗證,如驗證培養(yǎng)基對銅綠假單胞菌的生長支持能力、選擇性和特異性等。例如在藥品微生物限度檢查中,驗證相關(guān)培養(yǎng)基能否有效支持該菌生長,以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
方法驗證:在相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法的驗證中,作為標(biāo)準(zhǔn)菌株確認(rèn)檢測方法的準(zhǔn)確性和可靠性,包括增菌、分離、鑒定等環(huán)節(jié)能否有效檢出銅綠假單胞菌。比如在新建立的食品中微生物檢測方法驗證時,使用該菌株來確定方法的檢出限、精密度等指標(biāo)。
實驗室能力評估:幫助實驗室評估自身的檢測能力和操作水平,定期使用該菌株進(jìn)行實驗,可及時發(fā)現(xiàn)實驗過程中存在的問題,如操作是否規(guī)范、設(shè)備是否正常運行等,以保證微生物檢測結(jié)果的質(zhì)量。
通常采用西林瓶包裝,內(nèi)裝凍干粉。常見規(guī)格可能為 1 支 / 盒等,具體會因產(chǎn)品批次和銷售形式有所不同。
西林瓶應(yīng)置于 2 - 8℃保存,避免反復(fù)凍融,以保持菌株的活性。
復(fù)蘇:復(fù)蘇前應(yīng)準(zhǔn)備適于該菌種生長的培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備,所有操作均應(yīng)在符合生物安全保護(hù)及無菌條件下進(jìn)行。啟開前,用 75% 酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,打開西林瓶膠塞,加入復(fù)蘇液,將凍干菌種制成懸浮液,然后用無菌滴管或移液器吸取適量,移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板或液體培養(yǎng)基上,按推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)和傳代保存。
培養(yǎng)和傳代:銅綠假單胞菌質(zhì)控菌種購買后應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)使用,復(fù)蘇后的菌種一般宜傳代 2 - 3 次后使用,菌種傳代 5 次后建議棄置。培養(yǎng)時需按照推薦的培養(yǎng)條件進(jìn)行,一般為 35℃,培養(yǎng)時間根據(jù)具體培養(yǎng)基和實驗?zāi)康亩ǎ缭谝恍┻x擇性培養(yǎng)基上可能需培養(yǎng) 48 小時左右。