詳細介紹
CCC小型中空纖維生物反應(yīng)器
可用于優(yōu)化培養(yǎng)基配方和亞克隆的篩選工具,可對分泌的產(chǎn)物進行濃縮,生長在培養(yǎng)基中的產(chǎn)物且不被稀釋。細胞可自然長至組織樣密度,即使從低分泌型的細胞株中也能收集和分析產(chǎn)物
1.1 MicroBrx低成本小巧中空纖維生物反應(yīng)器系統(tǒng)
1.1.1 MicroBrx:微升數(shù)量級的優(yōu)勢
1)高產(chǎn)出率:
MicroBrx 內(nèi)部螺旋狀空間 (IC) ,是中空纖維的內(nèi)部,僅占有總細胞培養(yǎng)體積的0.2毫升(相當于面積0.003平方米)。功能是支撐固定細胞。MicroBrx 外部螺旋狀空間(EC),是中空纖維的外部,占體積4.5毫升,功能是蓄積營養(yǎng)和(或)基礎(chǔ)培養(yǎng)基的生長補充。
IC和EC 之間由中空、半通透性(10-39 kDa MWCO)的纖維材料膜隔開。這意味著僅有廢棄產(chǎn)物小分子如乳糖和氨能進入到EC,而細胞本身也進不去。作為交換,細胞營養(yǎng)物如葡萄糖和谷氨酸鹽則進入IC,營養(yǎng)細胞。
在相對小容量的IC內(nèi),MicroBrx可將每毫升5 x 106-7細胞(貼壁細胞或懸浮細胞)大約擴增至2-5倍。因此,細胞產(chǎn)物邊分泌,邊被濃縮,避免了因更換EC中的培養(yǎng)基被稀釋。即使產(chǎn)物初來自于低分泌的細胞系,終得到的是濃縮的產(chǎn)物,可立即用于下游的應(yīng)用。
2)省時、省力
生長在生物微反應(yīng)器鐘的細胞不需要耗時的細胞培養(yǎng)過程、更換培養(yǎng)液,接種后三天就可以收集。生物微反應(yīng)器只需裝滿培養(yǎng)基并內(nèi)置一個二氧化碳細胞孵箱即可。將細胞接種至IC空間后,EC空間里的培養(yǎng)基在第二天更換,待到第三天,可收集細胞并對細胞產(chǎn)物進行分析。
由于包含培養(yǎng)基的EC空間比包含細胞的IC空間大,也不需更換EC培養(yǎng)基。大大節(jié)約了處理時間和添加培養(yǎng)基的成本。因此,MicroBrx 替代了耗時的細胞培養(yǎng)技術(shù)包括用培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿培養(yǎng)。由于檢驗限是微數(shù)量級,MicroBrx 也節(jié)約了與復雜化合物和細胞檢測相關(guān)的成本。
3)低污染風險
在細胞培養(yǎng)和更換培養(yǎng)基過程中,T-flasks 和滾動細胞培養(yǎng)瓶必須周期性打開和獲取。 由于MicroBrx 擁有獨立且封閉的中空纖維生物反應(yīng)器,因此外露帶來的污染風險是有限的。 此外,整個MicroBrx是一次性的,無需清潔和消毒。
1.2系統(tǒng)組成:Biovest 生產(chǎn)的HFBrx系統(tǒng)由儀器和耗材組成。
3 MicroBrxs (用于細胞培養(yǎng))
12 擴張器 (轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基)
6 紅色 Male Luer 插頭 (‘紅色帽子’)
6 綠色 Male Luer 插頭 (‘綠色帽子’)
15無菌的 3-ml 注射器 (to hold/transfer media)
12 無菌的 20-ml 注射器(to hold/transfer media)
1.3 性能指標
儀器 | MicroBrx |
替代物 | T-flasks |
規(guī)模 | 研發(fā) |
實驗需要的儀器 | CO2 孵育箱,3-ml 和 20-ml 注射器 |
產(chǎn)量 | 僅用于研發(fā) |
1.4 應(yīng)用
Biovest生產(chǎn)的中空纖維MicroBrx(HFBrx)可成功培養(yǎng)懸浮或粘附細胞系,生產(chǎn)多種分泌蛋白,用于研發(fā)、生產(chǎn)、診斷和治療。
Biovest生產(chǎn)的HFBrx可培養(yǎng)的細胞系包括:
• 雜交瘤Hybridoma
• BHK
• MDCK
• 昆蟲卵巢細胞
• CHO
• Vero
• 人胚腎293細胞株和其他
CCC小型中空纖維生物反應(yīng)器盡管單克隆抗體產(chǎn)HFBrx系統(tǒng)的生產(chǎn)的主要材料,其他分泌蛋白也可通過此方式生產(chǎn)。此外,HFBrxs越來越多被用于產(chǎn)生病毒和病毒樣顆粒的生產(chǎn)。