目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細(xì)胞>>克隆感受態(tài)細(xì)胞 非電擊>> XL1-BlueChemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50支100ul |
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貨號 | ABG008-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
主要用途 | 細(xì)胞培養(yǎng) |
XL1-Blue Chemically Competent Cell
基因型:
recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 (rk-,mk+), relA1lac [F'proAB lacIqZ?M15: Tn10 (tetR)]
簡要說明:
XL1-Blue菌株能保證高拷貝質(zhì)粒穩(wěn)定復(fù)制,recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。hsdR17突變導(dǎo)致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。lacIqZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于藍(lán)、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素抗性。High5TM系列XL1-Blue感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>1×109cfu/μg。
操作說明:
1.XL1-Blue感受態(tài)細(xì)胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基,混勻后37℃,200rpm復(fù)蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
注意事項:
1. 感受態(tài)細(xì)胞最好在冰上融化。
2.混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
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