目錄:合肥恩派爾貿(mào)易有限公司>>Abnbio感受態(tài)細(xì)胞>>克隆感受態(tài)細(xì)胞 非電擊>> HB101Chemically Competent Cell克隆感受態(tài)細(xì)胞
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50支100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | ABG016-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
| 主要用途 | 細(xì)胞培養(yǎng) |
HB101 Chemically Competent Cell
基因型：
F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-) recA13 leuB6 ara-14 proA2lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (strR) glnV44λ-
簡要說明：
HB101菌株是 E. Coli K12菌株和 E. Coli B 菌株的雜合產(chǎn)物（同時也是Stbl3的原始菌株）。recA13突變可有效抑制長片段末端重復(fù)區(qū)的重組，降低錯誤重組的概率；但不含核酸酶endA1突變，體內(nèi)核酸酶含量較高，提取質(zhì)粒時務(wù)必使用質(zhì)粒提取試劑盒中去蛋白液。hsdS20背景使HB101缺失內(nèi)切酶系統(tǒng)，增強(qiáng)了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量；此菌株具有LIAN霉素抗性；不存在lacIqZΔM15，不可用于藍(lán)、白斑篩選。 High5TM系列HB101感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>5×108cfu/μg。
操作說明：
1.HB101感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物并用手打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的2YT或LB無菌培養(yǎng)基，混勻后37℃，200rpm復(fù)蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
注意事項：
1.感受態(tài)細(xì)胞處于冰水混合狀態(tài)時立即插入冰上。
2.混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
4.操作過程中勿將感受態(tài)暴露于氧化性環(huán)境中，例如超凈臺應(yīng)將臭氧排凈后再使用。
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
3
化工儀器網(wǎng)