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| 供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 1*10^6 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 科研用途 |
LNCAP 人前列腺癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）介紹
人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離，該患者經確診為前列腺癌轉移。這株細胞對5-α-二氫睪酮(生長調節(jié)子和酸性磷酸脂酶產物)有響應。這株細胞并不形成*的單層，而是形成集落，在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養(yǎng)基變酸。生長很慢，傳代后48小時內不應擾動。當培養(yǎng)瓶封包后，多數(shù)細胞從培養(yǎng)瓶底分離，懸浮在培養(yǎng)基中。收到后，在通常培養(yǎng)單層細胞的條件下培養(yǎng)24到48小時，以使細胞再貼壁。此后可以換上新鮮培養(yǎng)液。如果需要，培養(yǎng)瓶內容物可以收集，300g離心15分鐘，以10毫升培養(yǎng)液重懸并培養(yǎng)到一個單獨的培養(yǎng)瓶中。請使用Corning的Cellbind培養(yǎng)瓶培養(yǎng)。
細胞特性
1） 來源：前列腺；左鎖骨淋巴結癌轉移灶
2） 形態(tài)：上皮細胞樣
3） 含量：>1x106 個/mL
4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：
（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；
（2）存活細胞，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
（3）收到細胞后請拍照，3天內如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系。
LNCAP 人前列腺癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）用途：僅供科研使用。
細胞接受后的處理：
1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3） 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml新的*培養(yǎng)基。
4） 如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。
5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們取得聯(lián)系。
細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．T24 人膀胱癌細胞/STR鑒定/鏡像綺點（iCell）處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2到1:5的比例進行。
細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。
鏡像綺點（上海）細胞技術有限公司主要產品和技術服務：
一、原代細胞服務
各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源；
多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源；
原代細胞分離和培養(yǎng)相關試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等；
原代細胞相關技術服務和整體實驗外包服務；
二、細胞株/系服務
細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關說明書；
細胞系培養(yǎng)過程的技術指導；
細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關生長因子、試劑等；
三、iPS細胞
iPS細胞基礎培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層在）；
iPS細胞增殖及冷凍保存；
iPS基礎培養(yǎng)技術實習；
新藥及實驗儀器上市前評估；
四、技術外包服務：各類細胞生物學實驗、分子生物學實驗、顯微鏡拍照服務等
五、其他：根據(jù)客戶需要定制服務等
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