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YAC-1 小鼠淋巴瘤細胞/鏡像綺點（iCell）介紹

YAC-1是一個淋巴瘤，將Moloney白血病病毒(MLV)接種到新生A/Sn小鼠中生成。 細胞對NK細胞的活動敏感，對NK細胞活性檢測十分有用。檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性。

細胞特性

1） 來源：Moloney鼠科白血病毒(Mo-MuLV)感染；淋巴瘤

2） 形態(tài)：淋巴母細胞，懸浮生長

3） 含量：>1x106 個/mL

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存

可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：

（1）干冰運輸，收到后立即轉(zhuǎn)入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；

（2）存活細胞，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

（3）收到細胞后請拍照，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系。

細胞接收后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。

2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3） 將T25瓶中的培養(yǎng)基離心后，去上清，添加6ml新的*培養(yǎng)基，加入新的T25瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

4) 如果細胞長滿80%請及時進行細胞傳代.

5） 接到YAC-1 小鼠淋巴瘤細胞/鏡像綺點（iCell）次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

細胞用途：僅供科研使用。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2） 細胞培養(yǎng) ：可通過添加新的培養(yǎng)基或換液來維持細胞的生長，推薦細胞的初始細胞密度為3 X 105 cells/mL。維持細胞的生長密度為2 X 105 -2 X 106 cells/mL。

3） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 將細胞懸液按1：2到1:5比例分到新皿中或者瓶中，補加培養(yǎng)基至6ml，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。

下面T25瓶為類；

1，細胞凍存時，取上清，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2，4min ，1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。

3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

鏡像綺點（上海）細胞技術(shù)有限公司主要產(chǎn)品和服務介紹：

        一、原代細胞服務：
               各類模式哺乳動物的多種原代細胞資源
               多種人源性正常及腫瘤原代細胞資源
               原代細胞分離和培養(yǎng)相關(guān)試劑、kit、培養(yǎng)基添加劑等
               原代細胞相關(guān)技術(shù)服務及整體實驗外包服務

        二、細胞系服務：
               細胞株/系培養(yǎng)、增殖、凍存和相關(guān)說明書
               細胞系培養(yǎng)過程的技術(shù)指導
               細胞系培養(yǎng)基、添加劑、血清及相關(guān)生長因子、試劑等

        三、iPS細胞服務：
               iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)（有滋養(yǎng)層or無滋養(yǎng)層）
               iPS細胞增殖及冷凍保存
               iPS基礎(chǔ)培養(yǎng)技術(shù)實習
               新藥及實驗儀器上市前評估

        四、其他技術(shù)外包服務、客戶定制服務等

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