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                                       免疫組化實(shí)驗(yàn)

免疫組化實(shí)驗(yàn)根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理，組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合，再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng)，前者再用標(biāo)記辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如鏈霉親和素等）結(jié)合，后通過呈色反應(yīng)或熒光來顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分，在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物，從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。
主要步驟
冰凍切片
1、將切好的冰凍切片，用4℃冷丙酮固定5～30min，PBS洗5～10min 3minX3
2、滴加0.3%TritonX-100，37℃孵育20～40min，PBS洗5～10min X3
 
石蠟切片
1、將石蠟切片置于烤箱60℃1h，然后按常規(guī)脫蠟至水
2、滴加0.3%TritonX-100，37℃孵育20～40min，PBS洗5～10min X3
 
3、滴加3%H2O2，37℃孵育5～30min，PBS洗5～10min X3
4、滴加山羊血清封閉液，37℃孵育5～30min，傾去勿洗
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，4℃孵育
6、取出切片，室溫放置30～60min，PBS洗5～10min X3
7、滴加生物素化二抗，37℃20～40min，PBS洗5～10min  X3
8、滴加辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素，37℃20～40min，PBS洗5～10min X3
9、配制DAB顯色液，37℃顯色10-30min，充分水洗
10、蘇木素復(fù)染，水洗返藍(lán)
11、酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片
客戶提供
① 組織：新鮮或固定（10%中性甲醛、4%多聚甲醛）組織樣本；
② 細(xì)胞：新鮮（大于10E6）或固定（10%中性甲醛、4%多聚甲醛）細(xì)胞樣本；
③ 切片：石蠟切片，冰凍切片以及細(xì)胞爬片，涂片；
④ 實(shí)驗(yàn)材料：一抗；
 伯信提供
① 染色后的切片；
② 電子圖片；
③ 實(shí)驗(yàn)報(bào)告（材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實(shí)驗(yàn)結(jié)果）；

目前，生物科技（上海）有限公司，主營(yíng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)、服務(wù)、動(dòng)物模型構(gòu)建、細(xì)胞株、elisa試劑盒等，歡迎廣大科研愛好者前來咨詢選購(gòu)！