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8色譜柱沖洗&預(yù)平衡
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國產(chǎn)液相色譜柱的正相柱及反相柱使用方法
國產(chǎn)液相色譜柱的分離作用是在填料與流動相之間進(jìn)行的，液相色譜柱的分類是依據(jù)填料類型而定。
正相柱：多以硅膠為柱填料。根據(jù)外型可分為無定型和球型兩種。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN，-NH2等官能團(tuán)即所謂的鍵合相硅膠。
反相柱：主要是以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合十八烷基官能團(tuán)的非極性填料。也有無定型和球型之分。
正相色譜柱的使用方法：
1.新柱子可直接用流動相。推薦用正己烷-乙腈以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積，再根據(jù)流動相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速沖10倍柱體積，zui后換成流動相；
2.正相使用時，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于還原糖的分析；流動相要*脫氣，并不得含有羰基化合物和過氧化物；
3.任何時候更換流動相時都要確保新流動相與柱子原保存液可互溶。
反相色譜柱的使用方法：
1.先用正己烷-乙腈以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積，再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、異丙醇、甲醇、甲醇-水沖柱子；
2.以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉水溶液沖柱子，立即用水沖洗，再換成流動相；
3.配制流動相時，應(yīng)各組分分別量取，比例較小的組分要精密量取，需調(diào)pH值時要精密到0.1；
4.反相條件下使用時，要特別注意控制pH值范圍，pH值越低越有發(fā)生水解的危險，流動相中水的比例越高當(dāng)然也越有發(fā)生水解的危險。的pH范圍在pH 3-7；
5.如果要使用的流動相中還含有緩沖鹽類，建議在用分析流動相之前，先用不含緩沖鹽的同比例流動相過渡，這樣可避免緩沖鹽在分析柱內(nèi)的析出。