葡萄糖是大多數(shù)生物體中能量供應(yīng)的主要來源，目前的研究顯示，葡萄糖攝取異常跟多種疾病相關(guān)，例如在許多癌癥細胞中, 表現(xiàn)有葡萄糖攝取的上調(diào), 從而表現(xiàn)出很高的有氧糖酵解比率；胰島素耐受細胞在遇到胰島素刺激時, 會出現(xiàn)葡萄糖攝入減弱。因此葡萄糖攝取的檢測成為許多細胞代謝相關(guān)疾病中的一個重要的指標(biāo)。

通過測量組織和細胞中葡萄糖類似物2-脫氧葡萄糖（2-DG）的攝取已被廣泛認為是一種測定葡萄糖攝取的可靠方法，可用來評估萄糖的攝取量以及研究葡萄糖代謝的調(diào)節(jié)和胰島素抵抗的機制。通常我們是通過使用同位素氚或C14標(biāo)記的非代謝型的2-DG來檢測2-DG的攝入量。然而，同位素標(biāo)記探針的使用較為昂貴的，并且檢測時需要繁瑣的特殊處理程序。

葡萄糖攝取分析解決方案如下：

AAT 的Screen Quest™比色法葡萄糖攝取分析試劑盒可采取非放射性分析分析的方法對組織或培養(yǎng)細胞進行葡萄糖攝取分析。

在檢測過程中，2-DG被葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白吸收，并代謝成2-DG-6-磷酸（2-DG6P），不能代謝的2-DG6P在細胞中積累，積累的量與細胞的葡萄糖攝取成正比，累積的2-DG6P被酶促氧化并產(chǎn)生NADPH，然后通過顯色NADPH探針特異性檢測NADPH，通過酶標(biāo)儀讀取570nm-610nm的OD值信號即可反應(yīng)2-DG的攝取情況。

檢測結(jié)果展示：

在分化的3T3-L1脂肪細胞和3T3-L1成纖維細胞中對2DG攝取進行檢測。使用SpectraMax（Molecular Devices）微孔板讀板器，在黑孔/透明底細胞培養(yǎng)Poly-D賴氨酸板子中，使用Screen Quest™比色法葡萄糖攝取檢測試劑盒進行檢測。

A：陰性對照，無胰島素，無2-DG處理.

B：在無胰島素的情況下2DG攝取.

C：在1mM胰島素存在下2DG攝取.

D：在1mM胰島素和200 mM促視黃素存在下2DG攝取.

E：在1mM胰島素和5mM D-葡萄糖存在下2DG攝取.

比色法葡萄糖攝取試劑盒，還有2-NBDG葡萄糖攝取檢測試劑盒，2-NBDG是一種熒光標(biāo)記的葡萄糖示蹤劑，2-NBDG通過與葡萄糖相同的葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白（GLUT）轉(zhuǎn)運到細胞中。一旦2-NBDG被細胞攝取，它就在C-6位置發(fā)生磷酸化，得到2-NBDG-6-磷酸，它很好地保留在細胞內(nèi)。與其他葡萄糖示蹤劑（例如2-DG或FDG）相比，2-NBDG可實現(xiàn)在單細胞水平上具有高時間和空間分辨率的2-NBDG的原位測量。（適用于熒光顯微鏡和流式細胞儀檢測）

細胞中2-NBDG攝取的測定原理: 一旦2-NBDG被細胞吸收，它會在C-6位置進行磷酸化，生成2-NBDG-6-磷酸鹽，該磷酸鹽會很好地保留在細胞內(nèi), 熒光強度與細胞葡萄糖攝取活性成正比。

文章來源：武漢艾美捷科技有限公司

葡萄糖攝取分析丨艾美捷高性價比試劑盒

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