脂質(zhì)包被珠被設(shè)計用于蛋白質(zhì)下拉實驗。用于檢測純化蛋白質(zhì)、細胞裂解物中蛋白質(zhì)的脂質(zhì)結(jié)合，或放射性標記的體外翻譯產(chǎn)物的結(jié)合。

PtdIns珠由瓊脂糖組成，每毫升珠含有10納摩爾的結(jié)合PtdIns，足以進行幾次蛋白質(zhì)結(jié)合實驗。每1mL珠粒包括少量對照珠粒。更多數(shù)量的控制珠也可供購買。

作為Biogradetech-d家代理，艾美捷科技強烈推薦Biogradetech熱銷產(chǎn)品 PtdIns 瓊脂糖珠。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

磷脂酰肌醇(PtdIns)是細胞膜中的關(guān)鍵組成部分，對細胞信號傳導至關(guān)重要。本文旨在探討PtdIns在細胞信號傳導中的作用，并分析其在利用瓊脂糖珠進行生物分子純化過程中的應(yīng)用。

PtdIns在細胞信號傳導中的作用

PtdIns通過其磷酸化形式，如PtdIns(4,5)P2，參與細胞內(nèi)鈣離子的調(diào)控、細胞骨架的重組以及細胞增殖等多種生理過程。PtdIns的磷酸化狀態(tài)受到多種激酶和磷酸酶的調(diào)控，這些酶的活性變化直接影響細胞的生理反應(yīng)。

瓊脂糖珠在生物分子純化中的應(yīng)用

瓊脂糖珠是一種多孔的凝膠顆粒，常用于DNA、RNA和蛋白質(zhì)的提取和純化。它們具有高吸附容量和良好的生物相容性，是分子生物學實驗中的工具。

PtdIns與瓊脂糖珠的結(jié)合應(yīng)用

在某些特定的實驗中，PtdIns可以與瓊脂糖珠結(jié)合，用于特定的生物分子的富集和純化。例如，在研究PtdIns相關(guān)信號通路時，可以通過瓊脂糖珠富集特定的PtdIns結(jié)合蛋白，進而分析其功能和作用機制。

PtdIns在細胞信號傳導中扮演著重要角色，而瓊脂糖珠作為一種有效的純化工具，可以幫助科學家更好地理解和研究PtdIns的功能。未來，隨著技術(shù)的發(fā)展，PtdIns與瓊脂糖珠的結(jié)合應(yīng)用將為細胞生物學和分子生物學研究提供更多的可能性。

脂質(zhì)珠 - 蛋白質(zhì)協(xié)議：

我們提供以下協(xié)議作為指南，并強烈鼓勵研究人員查閱科學文獻并進行優(yōu)化實驗，以確立對其感興趣的蛋白質(zhì)z有利的條件。

充分混合珠（不要使用渦旋）。將50 – 100 微升的50%珠懸液轉(zhuǎn)移到0.5 – 1.5 毫升的管中。

以1000 x g或更低的速度離心珠。小心移除上清液，避免丟失珠。

用10倍過量的洗滌緩沖液洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復(fù)洗滌步驟兩次。

小心移除洗滌上清液，并將珠在含有您的蛋白質(zhì)的結(jié)合緩沖液中重新懸浮。 a. 對于純化的蛋白質(zhì)，使用1-10 微克的蛋白質(zhì)，用足夠的結(jié)合緩沖液稀釋形成50%脂質(zhì)珠懸液。 b. 對于細胞裂解物、提取物、亞細胞組分：使用大約1 毫克的總蛋白質(zhì)對1 毫升結(jié)合緩沖液。將整個1毫升的制備樣品加入到您洗滌過的珠中。

孵育蛋白質(zhì)-珠溶液1-3小時。孵育可以在室溫或4°C下進行，取決于您蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性。需要連續(xù)運動以保持珠懸浮。

離心珠并小心移除上清液。如果需要，上清液可以用來監(jiān)測未結(jié)合的蛋白質(zhì)。

用10倍過量的洗滌緩沖液洗滌珠。輕輕混合，孵育1-2分鐘。重復(fù)洗滌步驟五次。如果您選擇在結(jié)合緩沖液中使用牛血清白蛋白（BSA），請確保在進行下一步之前將其c底洗出。

在最后一次洗滌后，通過向珠中加入等體積的2X Laemmli樣品緩沖液（或類似物）并加熱至70°C 10分鐘來洗脫結(jié)合的蛋白質(zhì)。

加熱后，離心珠并移除上清液。將上清液儲存在4°C下，直到分析。丟棄珠。

蛋白質(zhì)可以通過SDS-PAGE分離，并通過凝膠的Coomassie藍染色、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移和免疫印跡來檢測感興趣的蛋白質(zhì)，或進行自顯影。

文獻參考：

1. Gálvez-Santisteban, M., Rodriguez-Fraticelli, A. and Martin-Belmonte, F. (2014). Phosphoinositides Coated Beads Binding Assay. Bio-protocol 4(3): e1039. 

Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產(chǎn)品技術(shù)研發(fā)服務(wù)起家，逐步發(fā)展了廣泛的產(chǎn)品線，并將其商業(yè)化銷售，包括蛋白質(zhì)、抗體、酶、培養(yǎng)基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質(zhì)組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經(jīng)科學、血液分析和高通量藥物篩選等領(lǐng)域。

PtdIns 瓊脂糖珠(蛋白標準品)PtdIns 瓊脂糖珠(蛋白標準品)