尿p質(zhì)醇ELISA是一種用于定量測(cè)定的競(jìng)爭(zhēng)性比色法人體尿液中游離p質(zhì)醇的含量。僅供研究使用。不用于診斷程序。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷產(chǎn)品p質(zhì)醇尿EIA，(96孔)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

p質(zhì)醇尿EIA，(96孔)檢測(cè)原理：

樣品中的p質(zhì)醇（抗原）與辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合的p質(zhì)醇競(jìng)爭(zhēng)，以結(jié)合微孔板（固相）上涂覆的有限數(shù)量的抗p質(zhì)醇抗體。孵育后，通過簡(jiǎn)單的固相洗滌進(jìn)行結(jié)合/游離分離。然后，結(jié)合部分中的HRP酶與TMB底物反應(yīng)，產(chǎn)生藍(lán)色，當(dāng)加入停止溶液（H2SO4）時(shí)，藍(lán)色變?yōu)辄S色。顏色強(qiáng)度與樣品中的p質(zhì)醇濃度成反比。通過校準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中p質(zhì)醇濃度。

供應(yīng)的材料：

儲(chǔ)存條件：

將所有試劑存放在2°C至8°C的暗處。試劑盒在試劑盒標(biāo)簽和分析證明書上的有效期前是穩(wěn)定的。僅在微孔板達(dá)到室溫時(shí)打開含有微孔板的袋子，并在使用后立即關(guān)閉。一旦打開，微孔板在試劑盒有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。不要在過期后使用試劑盒或其組分。

樣品處理：

尿液樣本適用于本檢測(cè)。重要提示：該試劑盒設(shè)計(jì)用于未處理的尿液樣本；使尿液pH值低于5.0的酸化處理可能會(huì)干擾檢測(cè)，導(dǎo)致異常結(jié)果。無(wú)需稀釋樣本。應(yīng)在單一容器中收集并混合24小時(shí)內(nèi)排出的總尿液量。不立即檢測(cè)的尿液樣本應(yīng)存放在2°C至8°C或-20°C（最長(zhǎng)6個(gè)月）的環(huán)境中。濃度大于200 ng/mL的樣本無(wú)需稀釋，這樣的樣本必須報(bào)告為“>200 ng/mL"。

試劑準(zhǔn)備和儲(chǔ)存：

在使用前，所有試劑必須平衡至室溫。只為使用的條數(shù)準(zhǔn)備足夠的試劑。標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S4）和對(duì)照品的準(zhǔn)備：使用前，在旋轉(zhuǎn)混合器上放置5分鐘。一旦打開，標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品在2°C至8°C下穩(wěn)定6個(gè)月。

檢測(cè)程序：

使用前至少30分鐘，讓所有試劑達(dá)到室溫（22-28°C）。未使用的包被微孔條應(yīng)密封在含有干燥劑的鋁箔袋中，并儲(chǔ)存在2°C至8°C。為了避免潛在的微生物和/或化學(xué)污染，切勿將未使用的試劑倒回原瓶中。為了提高測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性，需要對(duì)每個(gè)校準(zhǔn)曲線點(diǎn)（S0-S4）、每個(gè)對(duì)照、每個(gè)樣本以及空白進(jìn)行雙重測(cè)定，因此要為每個(gè)點(diǎn)準(zhǔn)備兩個(gè)孔。

1. 向微孔板的孔中加入10 ?L的標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S4）、樣本和對(duì)照品。

2. 向微孔板的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和對(duì)照孔中加入300 ?L的結(jié)合物。

3. 在37°C下孵育1小時(shí)。

4. 從每個(gè)孔中移除內(nèi)容物；用350 μL的1x工作洗滌液洗滌孔3次。

   重要提示：在每次洗滌步驟中，輕輕搖動(dòng)板子5秒鐘，并通過將倒置的板子輕敲在吸水紙上以去除多余的溶液。

   自動(dòng)洗滌器：如果使用自動(dòng)洗滌器，建議進(jìn)行6次洗滌步驟。

5. 向每個(gè)孔（樣本、標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和空白）中加入100 ?L的底物溶液。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長(zhǎng)。

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