弓形蟲(chóng)IgA酶免疫測(cè)定試劑盒為定性和半定量測(cè)定人血清或血漿中弓形蟲(chóng)IgA類(lèi)抗體（EDTA或肝素）提供了材料。本試驗(yàn)僅供研究使用。不適用于獨(dú)立程序。

作為ALPCO在中國(guó)的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦ALPCO熱銷(xiāo)產(chǎn)品剛地弓形蟲(chóng)(IgA) ELISA，(96孔)。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

剛地弓形蟲(chóng)(IgA) ELISA，(96孔)檢測(cè)原理：

弓形蟲(chóng)IgA ELISA試劑盒是一種固相酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）。樣本用y本稀釋液稀釋?zhuān)㈩~外與IgG-RF吸附劑一起孵育，以消除特定IgG的競(jìng)爭(zhēng)性抑制。這種預(yù)處理避免了假陰性結(jié)果。

微孔板作為固相，涂有滅活的弓形蟲(chóng)可溶性抗原（RH株）。稀釋后的樣本和現(xiàn)成可用的對(duì)照品被移液至這些孔中。在孵育過(guò)程中，陽(yáng)性樣本和對(duì)照品中的弓形蟲(chóng)特異性抗體與固定的抗原結(jié)合。

經(jīng)過(guò)洗滌步驟去除未結(jié)合的樣本和對(duì)照材料后，辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合的抗人IgA抗體被加入孔中。在第二次孵育過(guò)程中，這種抗IgA結(jié)合物特異性地結(jié)合到IgA抗體上，形成酶聯(lián)免疫復(fù)合物。

經(jīng)過(guò)第二次洗滌步驟去除未結(jié)合的結(jié)合物后，形成的免疫復(fù)合物（在陽(yáng)性樣本的情況下）通過(guò)與TMB底物孵育和發(fā)展出藍(lán)色來(lái)檢測(cè)。通過(guò)使用硫酸停止酶指示劑反應(yīng)，藍(lán)色變?yōu)辄S色。

這種顏色的強(qiáng)度與樣本中弓形蟲(chóng)特異性IgA抗體的數(shù)量直接成正比。使用ELISA微孔板讀數(shù)器在450納米處讀取吸光度。

提供的試劑：

1. 微孔板，12 x 8（可拆分）條，96孔；孔涂有滅活的弓形蟲(chóng)可溶性抗原（RH株）。（包括1個(gè)條架和1個(gè)蓋箔）

2. y本稀釋液*，1瓶，100 mL，即用型，呈黃色；pH 7.2 ± 0.2。

3. IgG-RF-吸附劑*，1瓶，6.5 mL，即用型，呈黃色；含有抗人IgG類(lèi)抗體。

4. 陽(yáng)性對(duì)照*，1瓶，1.0 mL，即用型；呈黃色，紅色瓶蓋。

5. 陰性對(duì)照*，1瓶，2.0 mL，即用型；呈黃色，黃色瓶蓋。

6. 截止對(duì)照*，1瓶，2.0 mL，即用型；呈黃色，黑色瓶蓋。

7. 酶結(jié)合物*，1瓶，20 mL，即用型，呈紅色，抗人IgA抗體結(jié)合到辣根過(guò)氧化物酶。

8. 底物溶液，1瓶，14 mL，即用型，四甲基聯(lián)苯胺（TMB）。

9. 停止溶液，1瓶，14 mL，即用型，含有0.2 mol/l H2SO4，避免與停止溶液接觸。它可能會(huì)引起皮膚刺激和灼傷。

10. 洗滌溶液*，1瓶，30 mL（20倍濃縮用于600 mL），pH 6.5 ± 0.1，見(jiàn)“試劑準(zhǔn)備"。* 含有非汞防腐劑

一般說(shuō)明：

? 在開(kāi)始測(cè)試之前，非常重要的一點(diǎn)是將所有試劑、樣本和對(duì)照品置于室溫！

? 一旦測(cè)試開(kāi)始，應(yīng)不間斷地完成所有步驟。

? 使用新的一次性塑料移液管尖嘴吸頭，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品或樣本都要更換，以避免交叉污染。

? 吸光度是孵育時(shí)間和溫度的函數(shù)。在開(kāi)始測(cè)定之前，建議所有試劑都準(zhǔn)備好，移除瓶蓋，所有需要的孔都固定在架上等。這將確保每個(gè)移液步驟的間隔時(shí)間相等，無(wú)中斷。

? 通常，酶促反應(yīng)與時(shí)間和溫度成線性關(guān)系。

? 使用后立即緊密封閉試劑瓶，以避免蒸發(fā)和微生物污染。

? 為了避免交叉污染和錯(cuò)誤升高的結(jié)果，準(zhǔn)確移液樣本，并在不濺出的情況下將結(jié)合物準(zhǔn)確分配到孔的底部。

? 在37°C孵育期間，用箔紙覆蓋微孔板條，以避免蒸發(fā)。

文獻(xiàn)參考：

1. P. Cassinotti, Human Toxoplasma gondii infections and their diagnosis Alpe Adria Microbiologiy Journal1995, 4, 235-246

2. M. Schleuning, Toxoplasma gondii Infektionen Deutsches ?rzteblatt 93, Heft 43, (Oktober 1996), B2182-B2185

3. NCCLS. Clinical Use and Interpretation of Serologic Tests for Toxoplasma gondii; Approved Guideline.NCCLS document M36-A [ISBN 1-56238-523-2]. NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA19087-1898 USA, 2004.

4. Wilson M, Jones JL, McAuley JM. Toxoplasma. In: Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Jorgensen JH,Yolken RH, editors. Manual of Clinical Microbiology. 8th ed. Washington, D.C.: American Society forMicrobiology; 2003. p. 1970-1980.

5. Remington JS, McLeod R, Thulliez P, Desmonts G. Toxoplasmosis. In: Remington JS, Klein JO, editors.Infectious Diseases of the Fetus and Newborn Infant. 5th ed. Philadelphia, PA: The WB Saunders Co.;2001. p. 205-346.

ALPCO產(chǎn)品種類(lèi)多樣，可測(cè)樣品來(lái)源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見(jiàn)長(zhǎng)。

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