類胰島素生長(zhǎng)因子（IGF）-I和II在循環(huán)中與特定的結(jié)合蛋白（IGF結(jié)合蛋白，IGFBP）結(jié)合。到目前為止，已經(jīng)鑒定出七種不同的蛋白IGFBP-1至7。IGF的生物利用度、運(yùn)輸和儲(chǔ)存由這些結(jié)合蛋白調(diào)節(jié)或促進(jìn)，它們根據(jù)生理和發(fā)育需求的差異性表達(dá)。循環(huán)中z豐富的IGFBP是IGFBP-3。與IGFBP-5一起，它能夠形成所謂的與IGF和酸性不穩(wěn)定亞基（ALS）的三元復(fù)合物。在循環(huán)中，幾乎所有的IGF都以這種三元復(fù)合物的形式存在，因此不能穿過內(nèi)皮屏障。只有非常少量的IGF或IGFBP-3存在于這個(gè)復(fù)合物之外。酸性不穩(wěn)定亞基是循環(huán)中IGF儲(chǔ)存機(jī)制的重要組成部分。研究表明，在ALS缺乏或ALS基因敲除小鼠中，循環(huán)中的IGF和IGFBP-3濃度顯著降低，導(dǎo)致生長(zhǎng)受損。

酸性不穩(wěn)定亞基是一種由605個(gè)氨基酸組成的前體蛋白。在運(yùn)輸過程中，對(duì)于ALS分泌必需的信號(hào)肽（AA 1-27）會(huì)被切除（Swiss-Prot P35858版本82）。成熟蛋白由578個(gè)氨基酸組成，包含約20個(gè)富含l氨酸的序列重復(fù)。除了富含l氨酸的重復(fù)序列，還描述了幾個(gè)潛在的N-糖基化位點(diǎn)。Miller BS等人能夠證明IGF、ALS和IGFBP-3的不w全糖基化會(huì)導(dǎo)致這些蛋白的血清濃度降低。ALS基因的突變或w全敲除會(huì)導(dǎo)致IGF/IGFBP-3缺乏，從而干擾生長(zhǎng)。

第一個(gè)ALS免疫分析法是由Baxter RC在1990年描述的。使用這種內(nèi)部放射免疫分析的研究表明，ALS在健康受試者的血清中濃度很高，但在其他體液如羊水、腦脊液或精液中不可檢測(cè)，盡管這些體液含有高水平的IGFBP-3。

該酶免疫測(cè)定試劑盒適用于測(cè)量人血清或EDTA/肝素/檸檬酸鹽血漿中的酸不穩(wěn)定亞基（ALS），僅供研究使用。僅供研究使用。不用于診斷程序。

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酸不穩(wěn)定亞基ELISA(96孔)檢測(cè)原理：

酸性不穩(wěn)定亞基（ALS）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）是一種所謂的夾心測(cè)定法。它利用兩種特異性強(qiáng)、親和力高的抗體來檢測(cè)這種蛋白。這些抗體是通過用特定肽段免疫兔子產(chǎn)生的，如Khosravi和Stadler之前所描述的[16, 17]。

樣本中的ALS與微孔板上固定的第一抗體結(jié)合。接下來的步驟中，生物s標(biāo)記的第二抗ALS抗體轉(zhuǎn)而與固定的ALS結(jié)合。然后，鏈霉親和素-過氧化物酶綴合物與生物s標(biāo)記的抗體結(jié)合，在最后的底物反應(yīng)中，顏色的轉(zhuǎn)變被催化，定量地依賴于樣本中ALS的水平。

最初，該測(cè)定法是針對(duì)內(nèi)部血清進(jìn)行校準(zhǔn)的，測(cè)量結(jié)果以mU/mL表示。在成功生產(chǎn)出真核重組ALS后，校準(zhǔn)轉(zhuǎn)移到了質(zhì)量單位（見校準(zhǔn)/可追溯性）。此外，重組材料被用來以質(zhì)量單位量化校準(zhǔn)品中的ALS含量。分析顯示，1mU ALS相當(dāng)于5 ng ALS，所有先前的測(cè)定法性能描述數(shù)據(jù)都相應(yīng)地轉(zhuǎn)換為ng/mL。

典型的標(biāo)準(zhǔn)曲線示例

以下數(shù)據(jù)僅供展示，不能替代在測(cè)定時(shí)生成的數(shù)據(jù)。

文獻(xiàn)參考：

1. Ballard. J.. et al.. On the nomenclature of the IGF binding proteins. Acta Endocrinol(Copenh). 1989. 121(5): p. 751-2.

2. Wilson. E.M.. Y. Oh. and R.G. Rosenfeld. Generation and characterization of an IGFBP7 antibody: identification of 31kD IGFBP-7 in human biological fluids and Hs578T humanbreast cancer conditioned media. J Clin Endocrinol Metab. 1997. 82(4): p. 1301-3.

3. Baxter. R.C.. Characterization of the acid-labile subunit of the growth hormone-dependentinsulin-like growth factor binding protein complex. J Clin Endocrinol Metab. 1988. 67(2): p.265-72. 

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