犬補體因子3（C3）檢測試劑盒是一種高度敏感的雙位點酶聯(lián)用于測定狗血漿和血清樣本中C3的免疫測定法（ELISA）。For僅供研究使用。不用于診斷程序

作為ALPCO在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品補體因子3(犬)ELISA, 96孔。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

補體因子3(犬)ELISA, 96孔檢測原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）的原理如圖1所示。在這種測定中，樣品中的C3與已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗C3抗體發(fā)生反應。通過洗滌去除未結合的蛋白質后，加入辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗C3抗體。這些酶標記的抗體與之前結合的C3形成復合物。經過再次洗滌后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測定與免疫吸附劑結合的酶。結合的酶量與測試樣品中C3的濃度成正比；因此，450納米處的吸光度是測試樣品中C3濃度的量度。測試樣品中C3的量可以從標準曲線中插值得出，并根據樣品稀釋進行校正。

需要的材料但未提供：

? 精密移液器（2 ?L至200 ?L），用于制備和分發(fā)稀釋液

? 試管

? 微孔板洗滌/抽吸器

? 蒸餾水或去離子水

? 微孔板讀取器（420 nm）

? 制備試劑和緩沖溶液所需的各種玻璃器皿

? 樣品收集用的離心機

? 血漿收集用的抗凝劑

? 計時器

試劑準備：

使用前將所有試劑置于室溫（16°C至25°C）。

1. 稀釋液濃縮物

提供的稀釋液為5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮物，4份dH2O）按1:5稀釋。

2. 洗滌液濃縮物

提供的洗滌液為20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮物，19份dH2O）按1:20稀釋。濃縮物在低溫儲存時出現結晶并不罕見。稀釋前將濃縮物加熱至30-35°C可以溶解結晶。

3. 酶標記檢測抗體

計算每個微孔板測試條所需的工作濃縮液量，通過向每個測試條使用的1X稀釋液中添加10 ?L酶標記檢測抗體和990 ?L。使用前立即稀釋，并避免光照。均勻混合，但要輕柔。避免產生泡沫。

4. 抗犬C3 ELISA微孔板

按提供的狀態(tài)使用。打開微孔板袋，從袋中取出板。取出在測定中不會使用的所有條和孔，放回袋中并重新密封，同時放回干燥劑。

5. 犬C3校準物

根據批次特定的分析證書進行準備。

樣本收集和處理：

所有血液成分和生物材料應視為潛在危險。處理和處置時遵循通用預防措施。

如果血液樣品出現凝塊、嚴重溶血、脂血或樣品完整性受到質疑，請記錄并謹慎解釋結果。

以下列出的樣品收集和儲存條件僅供參考。樣品穩(wěn)定性尚未評估。

血清樣品 - 應通過靜脈穿刺收集血液。血凝后通過離心分離血清。取出血清立即進行測定或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融。

血漿樣品 - 應將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即進行測定或分裝后儲存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復凍融。

已知干擾物質 - 濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。

結果計算：

1. 從所有孔的測試值（吸光度讀數）中減去平均背景值（標準0的平均吸光度讀數）。

2. 對每個標準的平均重復讀數進行平均，并使用結果構建標準曲線。通過使用能夠生成四參數邏輯曲線擬合的計算機軟件來減少數據來構建標準曲線。也可以使用二次多項式（二次）或其他曲線擬合；然而，它們對數據的擬合精度會較低。

3. 從標準曲線中插值得到測試樣品值。校正血清稀釋因子，以得出原始樣品中的C3濃度。

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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