IgA檢測(cè)試劑盒是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫測(cè)定法（ELISA），用于定量牛血漿和血清樣本中免疫球蛋白A（IgA）的測(cè)定。用于研究用途只有。不用于診斷程序。

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牛IgA ELISA試劑盒檢測(cè)原理：

雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）的原理如圖1所示。在這種測(cè)定中，樣本中的IgA與吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgA抗體發(fā)生反應(yīng)。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）偶聯(lián)的抗IgA抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的IgA形成復(fù)合物。經(jīng)過另一次洗滌步驟后，通過添加顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測(cè)定免疫吸附劑上結(jié)合的酶。結(jié)合酶的量與測(cè)試樣本中IgA的濃度直接相關(guān)；因此，450納米處的吸光度是測(cè)試樣本中IgA濃度的量度。測(cè)試樣本中IgA的量可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值得到，并根據(jù)樣本稀釋進(jìn)行校正。

材料需求（未提供）

精密移液器（2微升至1000微升），用于制備和分發(fā)稀釋液

試管

噴霧瓶或微孔板洗滌器/抽吸器

蒸餾水或去離子水

微孔板讀取器

用于制備試劑和緩沖液的各種玻璃器皿

計(jì)時(shí)器

抗凝劑（用于血漿樣本收集）

離心機(jī)

樣本收集和處理

所有血液成分和生物材料應(yīng)視為潛在危險(xiǎn)物。處理和處置時(shí)遵循通用預(yù)防措施。

如果血液樣本出現(xiàn)凝塊、嚴(yán)重溶血、脂血或樣本完整性存疑，請(qǐng)做好記錄并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。

以下列出的樣本收集和儲(chǔ)存條件僅供參考。樣本穩(wěn)定性未經(jīng)評(píng)估。

血清樣本：應(yīng)通過靜脈穿刺收集血液。通過離心分離血清和細(xì)胞。取出血清立即進(jìn)行測(cè)定或分裝后儲(chǔ)存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

血漿樣本：應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進(jìn)行離心。立即進(jìn)行測(cè)定或分裝后儲(chǔ)存于-80°C（最好）或-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

已知干擾物質(zhì)：高于0.1%濃度的疊氮化物和硫柳汞會(huì)抑制酶反應(yīng)。

樣本稀釋

測(cè)定要求每個(gè)測(cè)試樣本在使用前進(jìn)行稀釋。每次進(jìn)行測(cè)定時(shí)，所有樣本應(yīng)進(jìn)行雙重測(cè)定。推薦的稀釋比例僅供參考。稀釋應(yīng)基于未知樣本的預(yù)期濃度，以使稀釋后的樣本落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)。如果不確定樣本值，在運(yùn)行整個(gè)板之前，強(qiáng)烈建議對(duì)一個(gè)或兩個(gè)代表性樣本進(jìn)行系列稀釋測(cè)定。

血清和血漿樣本：建議起始稀釋比例為1:1000。要制備1:1000的y本稀釋液，將5微升樣本轉(zhuǎn)移到495微升1X稀釋液中。這得到1:100的稀釋。接下來，將1:100的樣本通過將30微升轉(zhuǎn)移到270微升1X稀釋液中進(jìn)行稀釋。這得到1:1000的稀釋。每個(gè)階段都要c底混合。

試劑準(zhǔn)備

稀釋液濃縮液 - 提供的稀釋液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液，19份dH2O）稀釋1:20。

洗滌液濃縮液 - 提供的洗滌液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮液，19份dH2O）稀釋1:20。濃縮液在儲(chǔ)存溫度低時(shí)可能會(huì)形成晶體。稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解晶體。

酶-抗體結(jié)合物 - 通過向每個(gè)微孔板測(cè)試條添加10微升酶-抗體結(jié)合物到990微升1X稀釋液中，計(jì)算每個(gè)微孔板測(cè)試條所需的工作結(jié)合物溶液量。使用前立即稀釋并避免光照。均勻混合，但要輕柔。避免起泡。

預(yù)涂覆ELISA微孔板 - 按提供狀態(tài)使用。打開箔袋，從袋中取出板。取出在測(cè)定中不會(huì)使用的所有條和孔，放回袋中并重新密封，連同干燥劑一起。

牛IgA校準(zhǔn)液 - 根據(jù)批次特定的分析證明書進(jìn)行準(zhǔn)備。

ALPCO產(chǎn)品種類多樣，可測(cè)樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經(jīng)生物學(xué)、骨代謝、心血管疾病和氧化應(yīng)激、細(xì)胞因子與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、糖尿病和肥胖癥、內(nèi)分泌學(xué)、甲狀腺功能、腸胃病學(xué)、免疫學(xué)、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個(gè)研究領(lǐng)域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領(lǐng)域見長。

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