F56-6A1.2.3單克隆抗體與增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（GFP）反應(yīng)。GFP是一種27kDa的蛋白質(zhì)，當(dāng)暴露在藍(lán)色至紫外線范圍內(nèi)的光下時(shí)，會(huì)發(fā)出亮綠色熒光。在細(xì)胞和分子生物學(xué)中，GFP已成為一種寶貴的工具。GFP通常用于可視化特定的細(xì)胞群，并作為基因表達(dá)和定位的報(bào)告者。YFP與GFP的不同之處在于T203Y處的突變；針對(duì)全長(zhǎng)GFP產(chǎn)生的抗體也應(yīng)檢測(cè)YFP和其他變體。

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ReadyTag抗GFP：

同型小鼠IgG2b

推薦稀釋液使用InVivoPure pH 7.0稀釋液

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免疫原全長(zhǎng)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（enhanced GFP）

報(bào)告應(yīng)用西方印跡法

免疫熒光

配方磷酸鹽緩沖液，pH 7.0

不含穩(wěn)定劑或防腐劑

內(nèi)毒素<2EU/mg（<0.002EU/μg）

通過LAL凝膠凝集試驗(yàn)測(cè)定

純度>95%

通過SDS-PAGE測(cè)定

無菌性0.2微米過濾

生產(chǎn)在無動(dòng)物設(shè)施中從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中純化

純化使用蛋白G

RRIDAB_2687789

分子量150千道爾頓

儲(chǔ)存抗體溶液應(yīng)以原始濃度在4°C下儲(chǔ)存。請(qǐng)勿冷凍。

文獻(xiàn)參考：

Immunofluorescence

Earley, L. F., et al. (2015). "Identification and characterization of nuclear and nucleolar localization signals in the adeno-associated virus serotype 2 assembly-activating protein" J Virol 89(6): 3038-3048.

腺相關(guān)病毒血清型2（AAV2）的組裝激活蛋白（AAP）是一種核仁定位蛋白，在將病毒衣殼VP3蛋白運(yùn)輸?shù)胶巳蔬M(jìn)行組裝中起著關(guān)鍵作用。在這里，我們鑒定和表征了AAP2羧基末端區(qū)域（氨基酸位置144至184）附近的AAV2-AAP（AAP2）核（NLS）和核仁（NoLS）定位信號(hào)（AAP2（144-184））。該區(qū)域從氨基末端到羧基末端包含五個(gè)富含基本氨基酸（BR）的簇，KSKRSRR（AAP2BR1）、RRR（AAP2B R2）、RFR（AAP2 BR3）、RSTSSR（AAP2B R4）和RRIK（AAP2B R5）。我們分別通過J氨酸/賴氨酸到B氨酸的突變或刪除AAP2BR和8個(gè)和1個(gè)綠色熒光蛋白（GFP）-AAP2BR和β-半乳糖苷酶-APA2BR融合蛋白創(chuàng)建了30個(gè)AAP2BR突變體，并通過免疫熒光顯微鏡分析了它們?cè)贖eLa細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi)定位。結(jié)果表明，AAP2（144-184）具有冗余的多部分NLS，4個(gè)AAP2BR的任何組合，但不是3個(gè)或更少，都可以構(gòu)成功能性的NLS-NoLS；AAP2BR1和AAP2BR2在核定位中起著最有影響力的作用，但如果所有4個(gè)其他AAP2BR都存在，則這兩個(gè)AAP2BR中的任何一個(gè)都是不必要的，從而產(chǎn)生3個(gè)不同的重疊NLS基序；并且NoLS以依賴于上下文的方式在五個(gè)AAP2BR和功能之間冗余地共享。AAP2BR突變不僅導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)定位異常，還不同程度地減弱了AAP2蛋白的表達(dá)，這兩種異常都對(duì)衣殼的產(chǎn)生產(chǎn)生了顯著的負(fù)面影響。因此，本研究揭示了AAP2中混合NLS和NoLS的組織，并深入了解了它們?cè)谝職そM裝中的功能作用。重要：腺相關(guān)病毒（AAV）已成為體內(nèi)基因治療的流行和成功的載體；然而，它的生物學(xué)尚未被W全理解。在這方面，最近發(fā)現(xiàn)的組裝激活蛋白（AAP）是一種非結(jié)構(gòu)、核仁定位的AAV蛋白，對(duì)病毒衣殼組裝至關(guān)重要，這為我們更好地了解病毒顆粒形成所需的基本過程提供了新的機(jī)會(huì)。在這里，我們鑒定了來自AAV血清型2（AAV2）的AAP羧基末端的堿性氨基酸簇，它們充當(dāng)核和核仁定位信號(hào)。我們還證明了它們?cè)诰S持AAP表達(dá)水平和有效生產(chǎn)病毒衣殼方面的重要性。深入了解AAP的功能可以闡明AAV衣殼組裝的要求和過程，這可能會(huì)改善用于基因治療的載體生產(chǎn)。這項(xiàng)研究也為越來越多的核和核仁定位信號(hào)研究做出了貢獻(xiàn)。

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