流感病毒是一種包膜病毒，主要根據(jù)內(nèi)部核蛋白（NP）的保守性抗原差異分為甲型（A）、乙型（B）和丙型（C）三種類型。其中，只有甲型和乙型流感病毒對人類具有臨床相關(guān)性。

在細胞單層中進行的噬斑測定是定量檢測感染性病毒和抗病毒物質(zhì)的常用方法。在這些測定中，每個感染性病毒顆粒在特定條件下繁殖，形成一個局部感染細胞區(qū)域，稱為噬斑。噬斑表現(xiàn)為死亡或破壞的細胞區(qū)域，可通過通用細胞染色檢測到。

Cell Biolabs的流感B型免疫噬斑測定試劑盒提供了一個準(zhǔn)確的系統(tǒng)，用于測定病毒的感染性滴度。與傳統(tǒng)的噬斑測定不同，該試劑盒使用特異性的抗流感B型核蛋白抗體進行免疫染色，以揭示感染細胞區(qū)域的噬斑。試劑盒提供的試劑足以在12孔板中進行最多60次滴定實驗。

作為Cell Biolabs全國總代理，艾美捷科技強烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品乙型流感免疫空斑檢測試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

乙型流感免疫空斑檢測試劑盒檢測原理：

第一天：在12孔或6孔板中接種MDCK細胞  

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第二天：用流感病毒系列稀釋液感染MDCK細胞，并添加覆蓋培養(yǎng)基  

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第五天：用抗流感病毒核蛋白抗體進行染色  

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計數(shù)陽性噬斑并計算病毒滴度  

相關(guān)產(chǎn)品

1. VPK-5170：RSV融合蛋白ELISA試劑盒  

2. VPK-5171：RSV核蛋白ELISA試劑盒  

3. VPK-5174：流感A型核蛋白ELISA試劑盒  

4. VPK-5175：流感B型核蛋白ELISA試劑盒  

5. VPK-5189：流感A型免疫噬斑測定試劑盒  

試劑盒組成（常溫運輸）

1. 5倍DMEM培養(yǎng)基（部件號51901B）：一瓶30毫升無菌瓶，含有5倍DMEM、碳酸氫鈉、非必需氨基酸和5毫克/毫升BSA。  

2. CytoSelect?瓊脂粉（部件號113001）：一瓶1.2克。  

3. TPCK-胰蛋白酶（100倍）（部件號51902C）：一瓶1毫升無菌管，含有100微克/毫升TPCK-胰蛋白酶和1毫克/毫升BSA。  

4. 抗流感B型核蛋白抗體（1000倍）（部件號51903C）：一瓶30微升。  

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記二抗（1000倍）（部件號10902）：一瓶50微升。  

6. DAB底物（25倍）（部件號10903）：一瓶1.5毫升。  

7. 稀釋液（10倍）（部件號10905）：一瓶4.5毫升。  

未提供材料

1. 流感B型病毒樣本  

2. MDCK細胞、細胞培養(yǎng)生長培養(yǎng)基和無菌DPBS  

3. 無菌細胞培養(yǎng)級水  

4. 微波爐或加熱塊  

5. 水浴鍋  

6. 10%中性緩沖甲醛  

7. 0.1% Triton X-100的PBS溶液  

8. 1% BSA/PBS溶液  

9. H?O?  

10. 顯微鏡  

保存方法

收到試劑盒后，將TPCK-胰蛋白酶、抗流感B型核蛋白抗體和二抗保存在-20℃。其他所有試劑盒組分保存在4℃。

結(jié)果示例

以下圖表展示了典型的滴定結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考，不應(yīng)用于解釋實際結(jié)果。

圖：流感B型病毒在MDCK細胞中的免疫噬斑測定滴定實驗  

使用不同稀釋度的流感B型病毒培養(yǎng)液感染MDCK細胞72小時。進行了抗流感B型核蛋白免疫染色（A）和結(jié)晶紫染色（B）。

圖1：流感A型病毒感染MDCK細胞的噬斑形成  

流感A型病毒用于感染MDCK細胞24至72小時。感染后24小時、48小時和72小時，按照檢測協(xié)議進行抗流感A型核蛋白免疫染色。

文獻參考：

1. Herz C, Stavnezer E, Krug R, Gurney T. (1981) Influenza virus, an RNA virus, synthesizes its messenger RNA in the nucleus of infected cells. Cell 26, 391–400.

2. Jackson DA, Caton AJ, McCready SJ, Cook PR. (1982) Influenza virus RNA is synthesized at fixed sites in the nucleus. Nature 296, 366–368.

3. Baer, A. & Kehn-Hall, K. (2014) Viral concentration determination through plaque assays: using traditional and novel overlay systems. J. Vis. Exp. 93, 52065.

Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈（San Diego），是有名的細胞學(xué)試劑品牌，作為前沿的細胞學(xué)分析檢測試劑盒生產(chǎn)商，為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細胞功能研究以及疾病等方面的g端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實驗室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。  

乙型流感免疫空斑檢測試劑盒乙型流感免疫空斑檢測試劑盒