以兔為宿主制備的針對含有單甲基化賴氨酸27（H3K27me1）的組蛋白H3的多克隆抗體，使用KLH偶聯(lián)的合成肽作為免疫原。

作為BPS Bioscience在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BPS Bioscience銷售產(chǎn)品Anti-H3K27me1多克隆抗體。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

Anti-H3K27me1多克隆抗體：

克隆性：多克隆

宿主物種/表達(dá)系統(tǒng)：兔

純化方法：親和純化

形式：水溶液

配方：含有0.05%疊氮化物和0.05% ProClin 300的PBS緩沖液

濃度：50 ?g/26 ?l

免疫原：合成肽

儲存/穩(wěn)定性

在-80°C下可保存長達(dá)2年。分裝以避免反復(fù)凍融。分裝后可在-20°C下保存至少一個月。

應(yīng)用

ChIP（2 ?g/ChIP）

ELISA（1:100 - 1:500）

點雜交（1:20,000）

Western Blot（1:1000）

免疫熒光（1:1000）

運輸溫度：-20°C或-80°C

物種反應(yīng)性：人

備注：每次免疫沉淀的抗體優(yōu)良用量應(yīng)由終端用戶確定。建議測試1 - 5 ?g/次。

注意事項：避免反復(fù)凍融。

科學(xué)分類：抗體

監(jiān)管狀態(tài)：僅限研究使用

染色質(zhì)免疫沉淀（ChIP）實驗結(jié)果

使用針對H3K27me1的抗體（產(chǎn)品編號25240）和優(yōu)化的qPCR引物組合，在人HeLa細(xì)胞中進(jìn)行ChIP實驗。實驗使用了10萬個細(xì)胞的剪切染色質(zhì)。抗體用量梯度為1、2、5和10 ?g/次ChIP實驗，并進(jìn)行了分析。以2 ?g/IP的IgG作為陰性免疫沉淀對照。定量PCR使用了活性基因GAPDH的啟動子區(qū)域引物作為陰性對照，以及其編碼區(qū)引物作為陽性對照。

抗體滴度測定

為了測定抗體滴度，使用針對H3K27me1的抗體（產(chǎn)品編號25240）、粗提血清和流穿液進(jìn)行ELISA實驗，抗體進(jìn)行梯度稀釋。使用的抗原是含有目標(biāo)組蛋白修飾的肽段。通過繪制吸光度與抗體稀釋度的關(guān)系圖，估計純化抗體的滴度為1:32,900。

交叉反應(yīng)性測試

使用針對H3K27me1的抗體（產(chǎn)品編號25240）進(jìn)行點雜交分析，測試其與其他修飾的肽段以及組蛋白H3和H4的未修飾序列的交叉反應(yīng)性。將含有相應(yīng)組蛋白修飾的肽段（100至0.2 pmol）點在膜上，抗體稀釋度為1:20,000。

Western Blot分析

使用針對H3K27me1的抗體（產(chǎn)品編號25240），對HeLa細(xì)胞的組蛋白提取物（15 ?g）進(jìn)行Western Blot分析?？贵w在含有5%脫脂奶粉的TBS-Tween中稀釋1:1000。右側(cè)標(biāo)記了目標(biāo)蛋白的位置，左側(cè)顯示了分子量標(biāo)記（單位：kDa）。

免疫熒光分析

人骨肉瘤（U2OS）細(xì)胞用針對H3K27me1的抗體（產(chǎn)品編號25240）和DAPI進(jìn)行染色。細(xì)胞用4%甲醛固定20分鐘，并用含有5%正常山羊血清的PBS/TX-100進(jìn)行封閉。

圖A：細(xì)胞用H3K27me1抗體（左側(cè)）在封閉液中稀釋1:1000進(jìn)行免疫熒光標(biāo)記，隨后用與Alexa568偶聯(lián)的抗兔抗體進(jìn)行二抗標(biāo)記，或用DAPI（右側(cè)）標(biāo)記，特異性標(biāo)記DNA。

圖B、C、D和E：分別在抗體與含有未修飾的H3K27以及單甲基化、雙甲基化和三甲基化H3K27的阻斷肽孵育后，用H3K27me1抗體對細(xì)胞進(jìn)行染色。

BPS Bioscience是一家通過ISO 9001:2015認(rèn)證的生命科學(xué)領(lǐng)域的供應(yīng)商，公司一直致力于開發(fā)藥物研發(fā)領(lǐng)域的重組蛋白酶、蛋白酶活性/抑制劑篩選試劑盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年創(chuàng)立，從創(chuàng)立至今一直致力于提供藥物研發(fā)領(lǐng)域的創(chuàng)新解決方案，以推動新的藥物發(fā)現(xiàn)a。公司主要關(guān)注的領(lǐng)域包括免疫療法、表觀遺傳學(xué)、CRISPR、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉(zhuǎn)移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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Anti-H3K27me1多克隆抗體Anti-H3K27me1多克隆抗體