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PCR實(shí)驗(yàn)室分區(qū)設(shè)置及要求
要求及功能分區(qū) PCR實(shí)驗(yàn)室分為bai四個區(qū)域，進(jìn)入各工作區(qū)域必du須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，zhi不dao同的工作區(qū)域使用 不同的工作服（例如不同的顏色）。
工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出，
四區(qū)域分別 1.試劑配制區(qū)n2.樣品處理區(qū)n 3.核酸擴(kuò)增區(qū)n 4.產(chǎn)物分析區(qū)n 如使用全自動分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并,三四區(qū)可合并為擴(kuò)增產(chǎn)物分析。
各區(qū)的功能是：
1.1.1 試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴(kuò)增試劑的配制、分裝和保存。
1.1.2 樣品處理區(qū)：樣品登記、分裝；核酸提取、保存和加樣。
1.1.3 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：擴(kuò)增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、登記及報告。
1.2 擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開，須使用不同的房間，兩區(qū)之間有一定的間隔。
1.3 使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進(jìn)行少量試劑配制。
1.4 在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準(zhǔn)備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi)： 1.4.1 在生物安全柜內(nèi)操作。
1.4.2 每個實(shí)驗(yàn)人員、實(shí)驗(yàn)組分別使用各自的試劑及耗材。
1.4.3 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。
1.4.4 用有效的方法對操作區(qū)域和共享器具在實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行清潔及消毒。
設(shè)計(jì)要求：
PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式，也可以是組合形式,現(xiàn)要主要是以組合形式為主流。完成一組PCR 實(shí)驗(yàn)，通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個實(shí)驗(yàn)過程，若實(shí)驗(yàn)工藝需要，還 應(yīng)增加樣品粉碎過程。
一、分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室 所謂分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室，是指完成上述實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn)，呈分散布置形式。
對于這種布置形式的PCR實(shí)驗(yàn)室，由于各個實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾，因此無需特殊條件要求。
二、組合形式
所謂組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室, 是指完成PCR四個實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房相鄰布置，組成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)域 的形式。對于組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室，由于各個實(shí)驗(yàn)間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間，以減少室內(nèi)外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染,可以通 過控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。
核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓，以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品，可以通 過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。
在理想情況下，PCR實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向 室內(nèi)。
PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有空調(diào)控制，要求將空調(diào)風(fēng)口安裝到定點(diǎn)，且高度為地面鋪 裝好后2600mm處。 如果使用熒光PCR儀，擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。
若房間進(jìn)深允許，可設(shè)PCR內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面，緩沖間 比專用走廊更有意義。 各個區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護(hù)屏障，避免 實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實(shí)驗(yàn)過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。 實(shí)驗(yàn)室的墻體，包括頂棚，應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；
所有陰角宜采用圓弧形線條過渡；墻體內(nèi) 壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。
主要設(shè)備 試劑準(zhǔn)備區(qū) 儀器設(shè)備主要有冰箱、超凈臺、加樣器、混勻器、天平和離心機(jī)等，加樣器、天平除了要專用外，還應(yīng)有定期校準(zhǔn)。 試劑分裝應(yīng)在超凈臺中進(jìn)行 擴(kuò)增反應(yīng)混合液應(yīng)使用分子生物學(xué)級的，試劑制備好后應(yīng)有質(zhì)檢：一是否有污染、二是檢測試劑的擴(kuò)增效果。 標(biāo)本制備區(qū)儀器設(shè)備主要有生物安全柜、加樣器、離心機(jī)、溫育儀、混勻器等 擴(kuò)增區(qū) 擴(kuò)增區(qū)的主要儀器是核酸擴(kuò)增儀、超凈臺、微量加樣器、離心機(jī)、可移動紫外燈。擴(kuò) 增儀需進(jìn)行校準(zhǔn)。并配備UPS電源，以防止由于電壓的波動，停電對擴(kuò)增效果的影響。 分析區(qū) 本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等 潔凈實(shí)驗(yàn)區(qū)的緩沖間部分面積不能超過主實(shí)驗(yàn)室的八分之一,這是有規(guī)定的.
主體結(jié)構(gòu)：主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁，從而解決容易污 染、積塵、不易清掃等問題。
結(jié)構(gòu)牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。 標(biāo)準(zhǔn)的四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)：將PCR過程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物分析四個獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個區(qū)域有一個 整體緩沖走廊。
每個獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié)，使整個PCR實(shí)驗(yàn)過程中試 劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。
可打開緩沖區(qū)，緩沖區(qū)和 PCR 擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門上 都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口，空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。
消毒：在三個實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。
在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū) 還設(shè)置移動紫外線燈，對實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。 不銹鋼傳遞窗：試劑和標(biāo)本通過機(jī)械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標(biāo)本在傳遞過程中不受污染（人物分流）。
地面地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。 照明燈具要選用凈化燈具，能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。 在建設(shè)的過程中應(yīng)注意： 規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。