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詳細(xì)介紹
人胚胎胰腺組織來源細(xì)胞；CCC-HPE-2價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人胚胎胰腺組織來源細(xì)胞；CCC-HPE-2價(jià)格
形態(tài)特性
品牌 貼壁生長
特征特性 取材自引產(chǎn)的11周胚胎組織，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H：
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1：
3傳代；3~4天1次。
傳代情況 P7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：9，11；D16S539：11，13；D18S51：12，13；D19S433：13，14；D21S11：29；D2S1338：17，23；D3S1358：16；D5S818：9，11；D7S820：10，12；D8S1179：10，13；FGA：21，25；TH01：7，9；TPOX：8，11；vWA：14，16；
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Human Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit 人組織型纖溶酶原激活劑Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-SAMDC S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GRIM19 干擾素/維甲酸誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體 規(guī)格 0.1ml
OPN ELISA Kit 大鼠骨橋素 96T
2-Oct 英文名稱： 陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 0.1ml
phospho-Bax (Thr167) 英文名稱： 磷酸化Bax抗體 0.1ml
Anti-SAMDC S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠的血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit 大鼠的血清白蛋白殘留檢測Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-VAP1 血管粘附蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh GATA-3 GATA結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格 0.1ml
BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 96T
phospho-NF1(Ser2817) 英文名稱： 磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 0.1ml
ARHGAP32 英文名稱： Rho GTP酶激活蛋白32抗體 0.2ml
Anti-VAP1 血管粘附蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人棕櫚?；さ鞍?(MPP6)ELISA試劑盒人96T12.5-800 pg/mL大鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒，英文名：Kim-1 ELISA KiISA Kit for Human Interferon omega-1小鼠γ-氨基丁酸A受體α2(γABRα2)ELISA試劑盒，英文名：γABRα2 ELISA Kit人白介素5(IL-5)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠DNA修復(fù)蛋白R(shí)AD50(RAD50)ELISA試劑盒，英文名：RAD50 ELISA KiISA Kit for Human Keratin, type I cytoskeletal 20大鼠轉(zhuǎn)錄因子P65(RELA)ELISA試劑盒，英文名：RELA ELISA Kit人富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒，英文名：ICA ELISA KiISA Kit for Human Macrophage-expressed gene 1 protein大鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒，英文名：CT-1 ELISA Kit人微管結(jié)合蛋白T( MAPT)ELISA試劑盒人96T7.8-500 pg/mL大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒，英文名：MBP ELISA Kit
人神經(jīng)細(xì)絲蛋白輕鏈多肽(NF-L)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠磷酸化胰島素受體(pISR1)ELISA試劑盒，英文名：pISR1 ELISA KiISA Kit for Human Myeloperoxidase大鼠前白蛋白(PA)ELISA試劑盒，英文名：PA ELISA Kit人BRCA1基因1相鄰蛋白(NBR1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠可溶性腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導(dǎo)劑(sTWEAK)ELISA試劑盒，英文名：sTWEAK ELISA KiISA Kit for Human Nuclear receptor corepressor 1大鼠激肽原(KNG)ELISA試劑盒，英文名：KNG ELISA Kit人PC4和SFRS1互作蛋白(PSIP1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)ELISA試劑盒，英文名：GAD-Ab-IgG ELISA KiISA Kit for Human Prostate stem cell antigen大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1)ELISA試劑盒，英文名：MCP-1 ELISA Kit人圍脂滴蛋白1(Perilipin-1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)ELISA試劑盒，英文名：sIL-1RⅡ ELISA Kit
預(yù)染蛋白Marker分子量標(biāo)準(zhǔn)(40-300kDa) 2x250μl/50次 MBI原裝
ZAP70 英文名稱： zeta相關(guān)蛋白70抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Dab1 (Tyr232) 磷酸化Disabled 1抗體 規(guī)格 0.1ml
GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
DECR1 英文名稱： 線粒體2,4-雙烯酰輔酶A還原酶1抗體 0.1ml
FCGR1 CD64 / FCGR1 鼠單抗 (FITC) Human
cPLA2(Rat Cytosolic Phospholipase A2,cPLA2 )ELISA Kit 大鼠胞漿型磷脂酶A2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-Astrocyte 人星形膠質(zhì)細(xì)胞抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
(Mouse anti-IVIgG antibody) ELISA Kit 小鼠抗IVIgG抗體 96T
NKX6.1 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NKX6.1抗體 0.2ml
Phospho-Bad (Ser118) 英文名稱： 磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 0.1ml
Anti-Astrocyte 人星形膠質(zhì)細(xì)胞抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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