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EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401培養(yǎng)

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更新時間:2018-04-18 13:18:41瀏覽次數:285

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應用公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術指導。歡迎廣大科研用戶!

詳細介紹

細胞名稱  EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

品牌 懸浮生長

特征特性 該細胞來源于一女性重癥肌無力患者的外周血。1994年由中國科學院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法 1:

2傳代;5-6天一次  

傳代情況 P8

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測 熒光法(-) 

STR -

同工酶

染色體

使用權限 A類

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM9401培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
TPA ELISA Kit 大鼠組織多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-ADMR/FITC 熒光素標記腎上腺髓質素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh FER/TYK3 酪氨酸蛋白激酶3抗體 規(guī)格 0.2ml

M-AChR ELISA Kit 大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體 96T

CXCL2 英文名稱: 巨噬細胞炎癥蛋白2( GROβ)抗體 0.1ml

AFP4b 英文名稱: AFP4b蛋白抗體 0.2ml

Anti-ADMR/FITC 熒光素標記腎上腺髓質素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
U-TSH(Mouse ultrasensitive thyroid-stimulating hormone) ELISA Kit 小鼠高靈敏度促甲狀腺激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-CIDE-B/FITC 熒光素標記促進凋亡基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Dog IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗犬IgM抗體 規(guī)格 0.1ml

Monkey IgG/RBITC 羅丹明標記猴IgG 0.3ml

LDHA 英文名稱: 乳酸脫氫酶抗體 0.1ml

孔雀石綠快速檢測卡 50T/盒 水產、飼料等

Anti-CIDE-B/FITC 熒光素標記促進凋亡基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
人非肌性肌球蛋白重鏈9(MYH9)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶1(UGT1)ELISA試劑盒,英文名:UGT1 ELISA KiISA Kit for Human Toll/interleukin-1 receptor domain-containing adapter protein大鼠環(huán)腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH)ELISA試劑盒,英文名:cADPRH ELISA KiISA Kit for Human Urocortin大鼠彈性蛋白酶(ELA)ELISA試劑盒,英文名:ELA ELISA Kit大鼠Toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒,英文名:TLR2 ELISA Kit豚鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒,英文名:IL-5 ELISA KiISA Kit for Human Adenosine deaminase-like protein小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒,英文名:GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61 ELISA KiISA Kit for Human Alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme小鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒,英文名:EPI ELISA Kit

人內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠膠質細胞系來源的神經營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒,英文名:GDNF ELISA KiISA Kit for Human Beclin-1小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒,英文名:B7-2/sCD86 ELISA KiISA Kit for Human Complement component 1 Q subcomponent-binding protein, mitochondrial小鼠骨保素(OPG)ELISA試劑盒,英文名:OPG ELISA KiISA Kit for Human Extracellular calcium-sensing receptor小鼠白介素28A(IL-28A)ELISA試劑盒,英文名:IL-28A ELISA KiISA Kit for Human Complement factor H小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒,英文名:PⅢNP ELISA KiISA Kit for Human Type I iodothyronine deiodinase小鼠轉錄激活因子3(ATF3)ELISA試劑盒,英文名:ATF3 ELISA KiISA Kit for Human Endothelial cell-specific molecule 1小鼠纖維膠凝蛋白1(FCN1)ELISA試劑盒,英文名:FCN1 ELISA Kit
山羊抗人 IgM/HRP 0.1ml 美國Jackson公司分裝

Viperin 英文名稱: 病毒抑制蛋白Viperin抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ATG7(Ser95) 磷酸化自噬相關蛋白7抗體 規(guī)格 0.1ml

NOS-2 peptide 一氧化氮合成酶-2多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Dio3 英文名稱: 甲狀腺素5'脫酶3抗體 0.1ml

Anti-AQP2 水通道蛋白-2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
MIP-3 Alpha/CCL20 ELISA Kit 大鼠巨噬細胞炎性蛋白3αMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Bad/FITC 熒光素標記相關死亡促進因子Bad抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ETS2 癌基因ETS2抗體 規(guī)格 0.2ml

8-epi-PGF2 Alpha (Rabbit 8-epi-prostaglandin F2alpha) ELISA Kit 兔8-異構前列腺素 96T

Phospho-MYPT1 (Thr853) 英文名稱: 磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體 0.1ml

Annexin V 英文名稱: 膜粘連蛋白5抗體 0.1ml

Anti-Bad/FITC 熒光素標記相關死亡促進因子Bad抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

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