化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-453價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-453價(jià)格
形態(tài)特性 上皮樣；多角形
品牌 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系由Cailleau R在1976年從一名48歲的患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的白人女性的心包滲出液中分離建立的。該細(xì)胞表達(dá)FGF的受體。
培養(yǎng)條件 L15：
Leibovitz Medium 10%FBS
傳代方法 1:2~1:6傳代；每周2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：10，12；D13S317：12；D16S539：9；D18S51：15，20；D19S433：13，14；D21S11：29，31；D2S1338：23，24；D3S1358：15，OL；D5S818：11；D7S820：10；D8S1179：10，12；FGA：18，23；TH01：6；TPOX：10；vWA：17，18；
同工酶
染色體 72~90
使用權(quán)限 A類(lèi)
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti- Beta-HCG/Gold 膠體金離子標(biāo)記小鼠抗人β亞基人絨毛膜促性腺激素單抗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
芳香化酶抗體 Anti-Aromatase 0.1ml
ZNF473 英文名稱： 鋅指蛋白473抗體 0.2ml
DNA Ligase IV 英文名稱： DNA連接酶4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體 規(guī)格 0.1ml
ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
TXB2(Human Thromboxane B2) ELISA Kit 人血栓素B2Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-lamin C 核纖層蛋白C抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL14 Kelch樣蛋白14抗體 規(guī)格 0.2ml
Inhbb(Human inhibin beta-B) ELISA Kit 人抑制素β-B 96T
Protein S 英文名稱： 蛋白S抗體 0.2ml
CDCA7L 英文名稱： 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體 0.2ml
Anti-lamin C 核纖層蛋白C抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人白介素11(IL-11)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2(ABCG2)ELISA試劑盒，英文名：ABCG2 ELISA KiISA Kit for Human C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain大鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒，英文名：PAL ELISA Kit人鈣調(diào)素(RC)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠激活素A(Activin A)ELISA試劑盒，英文名：Activin A ELISA KiISA Kit for Human Sulfotransferase 1A1大鼠乙酰輔酶A羧化酶α(ACACα)ELISA試劑盒，英文名：ACACα ELISA Kit人生長(zhǎng)抑素受體2(SSTR2)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠硒蛋白P1(SEPP1)ELISA試劑盒，英文名：SEPP1 ELISA KiISA Kit for Human Gamma-synuclein大鼠神經(jīng)疾病靶標(biāo)酯酶(NTE)ELISA試劑盒，英文名：NTE ELISA Kit人S100鈣結(jié)合蛋白A16ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)ELISA試劑盒，英文名：PCK1 ELISA Kit
人白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA試劑盒，英文名：f-βCG ELISA KiISA Kit for Human Transcription termination factor 2大鼠饑餓素/肥胖抑制素前激素原(GHRL)ELISA試劑盒，英文名：GHRL ELISA KiISA試劑盒人TM4SF20蛋白人96T0.312-20 ng/mL大鼠芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白(ARNTL)ELISA試劑盒，英文名：ARNTL ELISA KiISA Kit for Human Von Hippel-Lindau disease tumor suppressor大鼠補(bǔ)體成分4(C4)ELISA試劑盒，英文名：C4 ELISA Kit大鼠VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)ELISA試劑盒，英文名：VCC1 ELISA Kit大鼠10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)ELISA試劑盒，英文名：IP10 ELISA Kit豚鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒，英文名：CRP ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注
VE Cadherin 英文名稱： 上皮型鈣粘附分子抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-cdc2 (Ser39) 磷酸化周期素依賴激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
IRF-1(Interferon regulatory factor-1) 干擾素調(diào)節(jié)因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
DREF 英文名稱： DNA復(fù)制相關(guān)元件結(jié)合因子抗體 0.2ml
Anti-ADNP/NAP 活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Egr-1/FITC 熒光素標(biāo)記早期反應(yīng)基因-1/應(yīng)急反應(yīng)生長(zhǎng)基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-MMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh C2orf44 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框44抗體 規(guī)格 0.2ml
ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mg
H2BFM 英文名稱： H2B組蛋白家族M蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SAMD15/C14orf174 14號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框174 規(guī)格 0.2ml
Anti-MMP-1/FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
化工儀器網(wǎng)