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詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 人卵巢畸胎瘤細(xì)胞；PA-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞是從一名12歲的白人女性卵巢畸胎瘤患者的腹腔積液中分離建立的；該細(xì)胞可以形成緊密的編織狀的克隆，在低血清培養(yǎng)、低密度接種或用5-bromo-2'-deoxyuridine處理時(shí)可以分化為胚狀體。該細(xì)胞表達(dá)胚胎抗原PCC4，但未檢測到F9的表達(dá)。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:4~1:10傳代；每周2~3次?！?/span>
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：9，12；D13S317：9，10；D16S539：9，12；D18S51：15，18；D19S433：13；D21S11：29，31.2；D2S1338：24；D3S1358：15；D5S818：11；D7S820：9；D8S1179：14，15；FGA：24；TH01：7，9；TPOX：11；vWA：15，17；
同工酶
染色體 40~46，XX
使用權(quán)限 A類
人卵巢畸胎瘤細(xì)胞；PA-1培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-TRF/Gold 金離子標(biāo)記抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.5ml(15nm)
rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重組人表皮生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 100ug
β-抑制蛋白2抗體 Anti-β-arrestin 2 0.1ml
ZNF93 英文名稱： 鋅指蛋白93抗體 0.2ml
DNAH9 英文名稱： 軸絲動力蛋白重鏈9抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4EBP1(Thr36) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重組人表皮生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 100ug
TXB2 (Rabbit Thromboxane B2) ELISA Kit 兔血栓素B2Multi-class antibodies規(guī)格： 96T
Anti-CYP450/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞色素P450單氧化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh DACH1 細(xì)胞命運(yùn)決定因子DACH1抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記兔IgG(細(xì)胞流式同型對照) 0.1ml
lysozyme 英文名稱： 溶菌酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ZNF693/CASZ1 鋅指蛋白693抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-CYP450/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞色素P450單氧化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人ω-3脂肪酸受體1(O3FAR1)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)ELISA試劑盒，英文名：Tn-T ELISA KiISA Kit for Human Apelin-13小鼠胃泌素(Gastrin)ELISA試劑盒，英文名：Gastrin ELISA KiISA Kit for Human Arylsulfatase A小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒，英文名：FⅨ ELISA KiISA Kit for Human Contactin-1小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒，英文名：PTH ELISA KiISA Kit for Human Calponin-1小鼠膽固醇(CH)ELISA試劑盒，英文名：CH ELISA KiISA Kit for Human Early activation antigen CD69小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒，英文名：IFN-α ELISA KiISA Kit for Human Caveolin-1小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA試劑盒，英文名：MCP-1/CCL2 ELISA Kit
人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶PP1-α催化亞基(PP-1A)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒，英文名：FⅧAg ELISA KiISA Kit for Human Deoxyuridine 5'-triphosphate nucleotidohydrolase, mitochondrial小鼠抑制素βA(INHβA)ELISA試劑盒，英文名：INHβA ELISA KiISA Kit for Folic acid小鼠天冬酰胺合成酶(ASNS)ELISA試劑盒，英文名：ASNS ELISA KiISA Kit for Human Fibulin-1小鼠凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)ELISA試劑盒，英文名：F13B ELISA KiISA Kit for Human Glutaredoxin-3小鼠肌球蛋白重鏈1(MYH1)ELISA試劑盒，英文名：MYH1 ELISA KiISA Kit for Human Hemojuvelin小鼠多巴胺受體D1(DRD1)ELISA試劑盒，英文名：DRD1 ELISA Kit人孤啡肽受體(Nociceptin receptor)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠活化素A受體抗體(ACV-RAb)ELISA試劑盒，英文名：ACV-RAb ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注
VCAM1 英文名稱： 血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Bid(Ser61) 磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta) 巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
DUSP22 英文名稱： 雙特異性磷酸酶22抗體 0.2ml
Anti-beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽 1-40 (C端)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Ep-CAM/CD362(Human Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 人上皮細(xì)胞粘附分子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-GAB2 (Tyr452) 磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
ABCG2(Human ATP-binding cassette transporter G2) ELISA Kit 人腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2 96T
sFRP-4 英文名稱： 子宮內(nèi)膜抗體 0.1ml
Cpt1c 英文名稱： 腦型肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1C抗體 0.2ml
Anti-phospho-GAB2 (Tyr452) 磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
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