細胞名稱  615小鼠前胃癌瘤株；Fc培養(yǎng)
形態(tài)特性 實體瘤

品牌 體內(nèi)生長

特征特性 1975年建株；源自甲基芐硝胺灌胃誘發(fā)的615小鼠前胃癌，瘤細胞懸液同系小鼠皮下移植傳代建立。

培養(yǎng)條件 -

傳代方法 制備成細胞懸液接種至615等小鼠。

傳代情況 不詳

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR -

同工酶

染色體 -

使用權(quán)限 A類

615小鼠前胃癌瘤株；Fc培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-p53BP1/53BP1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠p53結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-Goat IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗羊IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml

C-藻藍素/藻藍蛋白抗體 Anti-C-PC 0.1ml

Rabbit Anti-pig IgG/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml

FARSLA/CML33 英文名稱： 慢性粒細胞白血病33抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PI3 Kinase p110 delta 磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-Goat IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗羊IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
RLN(Human Relaxin) ELISA Kit 人松弛肽/松弛素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-LDL 低密度脂蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh KNTC1/Kinetochore 著絲點關(guān)聯(lián)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

MS(Human melatonin sulfate) ELISA Kit 人褪黑色素 96T

Phospho-PSD95 (Tyr236 + Tyr240) 英文名稱： 磷酸化突觸后密度蛋白95抗體 0.1ml

Calcipressin 3 英文名稱： 鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白3抗體(唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白3) 0.1ml

Anti-LDL 低密度脂蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

TIMP-1(Human tissue inhibitor of metal protease 1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1 96T

Oxytetracycline 英文名稱： 土霉素抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh GPR65 G蛋白偶聯(lián)受體65抗體 規(guī)格 0.2ml

Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit 人谷氨酸脫羧酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

BRCAA1 英文名稱： 癌相關(guān)抗原BRCAA1抗體 0.2ml

Anti-Sema3A 臂板蛋白3A抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
TPO-Ab ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-TEM 1/CD248 內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-Bovine IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗IgG 規(guī)格 0.1ml

AZT ELISA Kit 大鼠疊氮胸苷 96T

Phospho-NMDAR1 (Ser897) 英文名稱： 磷酸化谷酸受體1抗體 0.1ml

BDKRB2 英文名稱： 緩激肽B2受體抗體 0.2ml

Anti-TEM 1/CD248 內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。