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小鼠雜交瘤細(xì)胞株;DMEQ1A3培養(yǎng)

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更新時間:2018-05-03 14:39:08瀏覽次數(shù):333

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;DMEQ1A3培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶!

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱  小鼠雜交瘤細(xì)胞株;DMEQ1A3培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

品牌 懸浮生長

特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1:

3傳代,3-4天傳1次  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測 陰性 

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 未定
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;DMEQ1A3培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-KLK1/FITC 熒光素標(biāo)記激肽釋放酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-SLC40A1/FPN1/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白SLC40A1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh alpha 1 Spectrin/Spectrin α 血影蛋白/收縮蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-human IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml

GMDS 英文名稱: 甘露糖脫水酶GMDS抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格 0.1ml

Anti-SLC40A1/FPN1/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白SLC40A1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit 小鼠D-乳酸脫氫酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-BrdU/FITC(Bromodeoxyuridine) 熒光素標(biāo)記兔抗溴脫氧尿苷抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh EphA3/Eph receptor A3 酪氨酸蛋白激酶受體A3抗體 規(guī)格 0.2ml

Lep IgG (Rabbit Leptospira IgG) ELISA Kit 兔鉤端螺旋體IgG 96T

MSS1 英文名稱: 26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型7抗體 0.1ml

ANKRD28 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)域28抗體 0.2ml

Anti-BrdU/FITC(Bromodeoxyuridine) 熒光素標(biāo)記兔抗溴脫氧尿苷抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

SAPAP3 英文名稱: PSD95結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml

ERC1 英文名稱: RAB6蛋白抗體 0.2ml

壞死因子-β抗體 Anti-TNF-β 0.1ml

Anti-TNF- Alpha /RBITC 紅色熒光素標(biāo)記壞死因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Jak3 (Tyr785) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體 規(guī)格 0.1ml

BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受體1A抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
HSP-27(Heat Shock Protein 27) 熱休克蛋白-27(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-CD17 CD17抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAP1/Acid Phosphatase 酸性磷酸酶抗體 規(guī)格 0.2ml

CPB1 Kit Human 人 Carboxypeptidase B1 / CPB1 ELISA配對抗體 ELISA

Phospho-Tie2 (Tyr992) 英文名稱: 磷酸化血管生成素受體2抗體 0.1ml

CD28 英文名稱: CD28抗體 0.1ml

Anti-CD17 CD17抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

 

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