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雜交瘤細胞株;10-2培養(yǎng)

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更新時間:2018-05-03 16:13:47瀏覽次數(shù):312

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

雜交瘤細胞株;10-2培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應用公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術指導。歡迎廣大科研用戶!

詳細介紹

細胞名稱  雜交瘤細胞株;10-2培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣

品牌 懸浮生長

特征特性 該細胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS:

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1:

3傳代,3-4天傳1次  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測 陰性 

STR

同工酶

染色體

使用權限 未定
雜交瘤細胞株;10-2培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-ISR- Beta /FITC 熒光素標記胰島素受體-β抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-Shank1/FITC 熒光素標記shank-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh AMY2A 胰腺α淀粉酶抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE PE標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml

GOSR1 英文名稱: 高爾基SNAP受體復合物1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-horse IgG/RBITC 羅丹明標記的兔抗馬IgG 規(guī)格 0.3ml

Anti-Shank1/FITC 熒光素標記shank-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MMP-1(Human Matrix metalloproteinase 1) ELISA kit 人基質金屬蛋白酶1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Orexin-A 增食欲素-A/欲激素AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh ICAM-3/CD50 細胞間粘附分子-3抗體 規(guī)格 0.1ml

Cortisol(Mouse Cortisol)ELISA Kit 小鼠皮質醇 96T

PCDH18 英文名稱: 原鈣粘附蛋白18抗體 0.2ml

C17orf57 英文名稱: 17號染色體開放閱讀框57抗體 0.2ml

Anti-Orexin-A 增食欲素-A/欲激素AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

rTaq DNA Polymerase 重組Taq DNA 聚合酶 10,000 ul

CD90 / Thy1 英文名稱: CD90抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh NUAK2 SNF1/AMP激酶相關激酶2抗體 規(guī)格 0.2ml

Humen IFN- Alpha 人α-干擾素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

C9orf172 英文名稱: 9號染色體開放閱讀框172抗體 0.2ml

anti-CIB1 鈣整合素結合蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
GSK(Human glycogen synthase kinase) ELISA Kit 人糖原合成酶激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-Nrf2 核因子2相關因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh IGF I 胰島素樣生長因子1抗體 規(guī)格 0.1ml

CT-1(Mouse cardiotrophln 1)ELISA Kit 小鼠心肌營養(yǎng)素1 96T

PTK5 英文名稱: 胃腸道相關酪酸激酶抗體(蛋白酪酸激酶5) 0.2ml

C16orf61 英文名稱: 16號染色體開放閱讀框61抗體 0.1ml

Anti-Nrf2 核因子2相關因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。

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