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猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1培養(yǎng)

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更新時間:2018-05-07 16:39:07瀏覽次數(shù):426

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶!

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱  猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞系來源于一雄性猞猁的皮膚組織。2000年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。

培養(yǎng)條件 M-199:

with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 10%FBS  

傳代方法 1:

2傳代;3-4天一次  

傳代情況 P4

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 熒光法(-)

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 B類
猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-FASN/FITC 熒光素標(biāo)記抗脂肪酸合成酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-Ephrin B/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Ephrin B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh C12ORF4 12號染色體開放閱讀框4抗體 規(guī)格 0.2ml

PACAP-38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38(抗原) 0.5mg

H7N9 HA 英文名稱: A型病毒H7N9 M1蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh RNF213 環(huán)指蛋白213 規(guī)格 0.2ml

Anti-Ephrin B/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠Ephrin B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LH Poultry ELISA Kit LH 禽類酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒Multi-class antibodies規(guī)格: 96T

Anti-DPPA2/FITC 熒光素標(biāo)記多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh CXCR5/CD185 細(xì)胞表面趨化因子受體5抗體 規(guī)格 0.1ml

Transferrin 轉(zhuǎn)鐵蛋白 1mg

KBP 英文名稱: KBP蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh WDR19 WD重復(fù)膜蛋白19抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-DPPA2/FITC 熒光素標(biāo)記多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

G protein beta 4 英文名稱: G蛋白β4抗體/鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白β亞基4 0.2ml

Rhesus antibody Rh ANKRD54 錨蛋白重復(fù)域54抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-Inhibin Alpha/Biotin 生物素化抑制素α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格 0.1ml

Anti-Runx3/FITC 熒光素標(biāo)記新型抑癌基因/一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-phospho-STAT6(pThr641)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-rat IgG 小鼠抗大鼠IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg

肌細(xì)胞生長抑制素抗體 anti-GDF-8 0.2ml

Donkey Anti-rabbit IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml

human Fibrinogen 英文名稱: 人纖維蛋白原抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Smad3(Ser204) 磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-rat IgG 小鼠抗大鼠IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。

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