?

PCR基本操作：

原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。

實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
土拉熱弗朗西斯菌PCR檢測試劑盒供應商PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
MMP-20  質(zhì)金屬蛋白酶20體進口/國產(chǎn)SRPK2  絲/蘇蛋白激酶SRPK2體

MMP-17  質(zhì)金屬蛋白酶-17體進口/國產(chǎn)TBRG4  轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白4體

MMP19  質(zhì)金屬蛋白酶18/19進口/國產(chǎn)TLK2  絲/蘇激酶TLK2體

MMP20  質(zhì)金屬蛋白酶20進口/國產(chǎn)ANKRD28  錨蛋白重復域28體

MMP24/ MMP25/MMP21  質(zhì)金屬蛋白酶-24體進口/國產(chǎn)SIPA1L2  信號誘導增相關蛋白1樣蛋白2體

MMP-22  質(zhì)金屬蛋白酶22體進口/國產(chǎn)DUSP7  雙特異性蛋白酶7體

MMP-23  質(zhì)金屬蛋白酶23體進口/國產(chǎn)PPM1B  蛋白質(zhì)酶1B體（PP2Cβ）phospho-NDEL1(Ser242)英文名稱：LMCD1子尾部結(jié)構(gòu)蛋白體

phospho-NDEL1(Thr219)英文名稱：Ly765號染色體開放閱讀框19體

NDUFS4英文名稱：LRP159號染色體開放閱讀框139體

NDUFA8英文名稱：LRRTM19號染色體開放閱讀框140體

NDUFV1英文名稱：Laminin 2 alpha9號染色體開放閱讀框142體

NDUFV2英文名稱：LIPG9號染色體開放閱讀框163體

NDUFA1英文名稱：sLOX 19號染色體開放閱讀框169體

NOD26英文名稱：Laminin Beta 29號染色體開放閱讀框173體