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技術(shù)文章

無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中添加哪些組分起作用探討

閱讀:133          發(fā)布時間:2024-1-2

      無血清細(xì)胞培養(yǎng)基(serum free medium,SFM)是一種特殊的細(xì)胞培養(yǎng)基,其中不含胎牛血清或其他血清成分。相對于傳統(tǒng)的含有血清的培養(yǎng)基,無血清培養(yǎng)基具有更高的質(zhì)量控制、更穩(wěn)定的性能、更好的可重復(fù)性以及更好的細(xì)胞增殖和生長能力。因此,無血清培養(yǎng)基已經(jīng)成為細(xì)胞培養(yǎng)和生物技術(shù)領(lǐng)域中的一種重要工具和技術(shù),但并不是所有細(xì)胞都適合在無血清培養(yǎng)基中生長(例如原代細(xì)胞和一些非癌細(xì)胞系,通常需要更加特殊的培養(yǎng)條件才能在無血清培養(yǎng)基中生長和繁殖。這些條件可以包括添加特殊的生長因子、細(xì)胞外基質(zhì)和其他補(bǔ)充物,以幫助維持細(xì)胞的生長和代謝)。因此,可以說無血清培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)基的一種類型,但并不等同于所有的細(xì)胞培養(yǎng)基。

       經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基,一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,加入成份全明確的或部分明確的血清替代成份,達(dá)到既能滿足動物細(xì)胞培養(yǎng)的要求,又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細(xì)胞貼壁生長,包括以下幾大類物質(zhì):

1、促貼壁物質(zhì):一般為細(xì)胞外基質(zhì),如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子,對許多細(xì)胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進(jìn)來自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化,這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞等。

2、促生長因子及激素:針對不同細(xì)胞添加不同的生長因子。激素也是刺激細(xì)胞生長、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì),有些激素是許多細(xì)胞bi不可少的,如胰島素。

3、酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長的細(xì)胞,需要用yi 酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。zui常用的是大豆yi 酶抑制劑。

4、結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白:常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養(yǎng)基的粘度,保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。

5、微量元素:硒是最常見的。



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