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血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。實驗室準確的應用及保存血清，才能使血清施展應有的效果。

一、血清儲存：

1.應用前處理:大部分血清在應用前必需滅活處置，即560C30分鐘。滅活的目標是去除血清中的補體身分，防止補體對細胞發(fā)生毒性同化。血清顛末滅活也會喪失一些對細胞無利的成分，如發(fā)展因子，是以也有人提出血清不經(jīng)滅活間接用于造就，這樣做的前提是確認血清中不含補體身分。對付一些品德高的胎牛血清和新牛血清能夠斟酌不經(jīng)滅活間接用于細胞造就。

2.應用濃度:自從有了分解造就基，血清便是作為一種增加身分與分解造就基混雜應用，應用濃度一樣平常為5-20}，最罕用是10}。過量血清容易使造就中的細胞發(fā)生變更，特別是一些二倍體的無窮細胞系，敏捷發(fā)展以后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。

3.貯存條件:血清一樣平常貯存于一200C，同時應防止重復凍融。購置大包裝的血清后，首先要滅活處置，而后分裝成小包裝，貯存于一200C，應用前熔化。熔化時最好現(xiàn)置于40C。熔化后的血清在40C不宜長期寄存，應盡快應用。

4.選購血清時，先從供應商處討取樣品停止實驗，選定一批后就要保存充足應用6個月至1年的量，直至用另一批顛末事后實驗的樣品取代。

二、血清的解凍：

當血清需要被解凍時，我們不建議大家把剛從-20℃中拿出的冰凍血清，直接放入4℃冰箱中過夜融化，也不要在室溫進行過夜解凍。

由于血清含有蛋白質(zhì)等干物質(zhì)，這類物質(zhì)容易先融化析出，水這類溶劑后融化，導致血清產(chǎn)生沉淀，影響使用效果。

因此，要盡可能保證所有成分同步融化，因此我們建議使用三步法融化。

需要注意的是，如果血清是儲存在-80℃冰箱中，三步法解凍前，應先將血清轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中存放1-2天。

一次解凍后，分裝至無菌離心管中，盡量保證每管是一次的用量，分裝管解凍也遵循三步法，解凍后需全部用完。

三、血清的應用：

1、血清的熱滅活：

血清進行熱滅活的目的是，利用較高的溫度使補體失活。由于胎牛血清會嚴格控制采血時間為5-8月齡的胎牛，此時還未形成完整的補體系統(tǒng)，因此，合格的胎牛血清，是不需要滅活的。

但是實驗中如果需要新生牛血清、小牛血清、豬血清或馬血清這些血清時，則需要根據(jù)實驗要求而定。

根據(jù)血清廠家多年來總結(jié)的經(jīng)驗，常規(guī)解凍后，40℃水浴加熱20分鐘即可，能夠盡可能地保留營養(yǎng)成分。

 

2、細胞培養(yǎng)的應用：

對于新的細胞系或從無血清培養(yǎng)轉(zhuǎn)變到胎牛血清培養(yǎng)的細胞系，需要進行適應期。在初始適應期，可以將血清濃度逐漸降低，直到細胞適應無血清培養(yǎng)為止。

 

3、關(guān)注血清的批次：

相同品牌的胎牛血清，在蛋白質(zhì)含量等方面，可能會存在批次差異，因此在同一實驗中最好使用來自同一批次的血清，以減少變異性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清，請進行驗證實驗以確保結(jié)果的可重復性。